2000 Fiscal Year Annual Research Report
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12671812
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| Research Institution | Kyushu Dental College |
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Principal Investigator |
藤原 智子 九州歯科大学, 歯学部, 助教授 (20047806)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
野口 知雄 九州歯科大学, 歯学部, 教授 (30073688)
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| Keywords | ペルオキシソーム / カタラーゼ / D-アスパラギン酸酸化酵素 / 軟骨細胞 / 蔗糖密度勾配遠心法 |
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| Research Abstract |
1.軟骨組織のペルオキシソームの形態、分布及び機能
動物では典型的なペルオキシソームは肝臓と腎臓にだけ存在しており、これ以外の組織には肝・腎のペルオキシソームより小型であるがカタラーゼを含むマイクロペルオキシソームが存在すると言われている。本研究ではまず軟骨細胞におけるペルオキシソームの存在を明らかにするためにカタラーゼ活性を持つオルガネラの検索を行った。
胎生5ヶ月のウシより頸骨骨端軟骨を摘出し、collagenase処理し、軟骨細胞画分を得た後、テフロンホモジナイザーで細胞を破砕し、600gで10分間遠心した上清(post nuclear fraction)を蔗糖密度勾配遠心法で分画したところ、肝臓のペルオキシソームとほぼ同じ沈降密度を持つペルオキシソームが存在することが明らかとなった。ペルオキシソームに存在する唯一のアミノ基転移酵素であるalanlne:glyoxylate aminotrasferase(AGT)は肝臓では高い活性を示すが、頸骨骨端軟骨のペルオキシソームにはほとんど検出されなかった。このことは軟骨細胞のペルオキシソームがアミノ酸代謝、グリオキシル酸代謝に関して肝臓ペルオキシソームとは異なることを示唆している。
哺乳動物にはほとんど存在しないと言われていたD-アミノ酸が各種組織に存在し、特にD-セリンとD-アスパラギン酸が高濃度に存在することが最近報告されている。これらのD-アミノ酸を酸化するD-アミノ酸酸化酵素とD-アスパラギン酸酸化酵素がペルオキシソームに局在していることが報告されている。胎生ウシの頸骨骨端軟骨細胞にD-Aspartate oxidaseが存在することを明らかにした。D-アスパラギン酸は動物の分化や生長と深い関係があることから、胎生期におけるD-aspartate oxidaseの活性の変化を調べ、軟骨の分化、生長におけるペルオキシソームの関与を今後明らかにする予定である。
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[Publications] Maki,K.: "A New Type of Matrix Vesicles is Found in Fetal Bovine Tracheal cartilage"Connect Tissue Res.. 41・2. 109-115 (2000)
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[Publications] Hayashi,S.: "Evolution of urate-degrading enzymes in animal peroxisomes"Cell Biochemistry and Biophysics. 32. 123-129 (2000)
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[Publications] Sakuraba,H.: "Metabolism of glyoxylate, the end product of purine degradation,in liver peroxisomes of fresh water fish"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 229. 603-606 (1996)
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[Publications] Fujiwara,S.: "Degradation of purines : Only ureidoglycollate lyase out of four allantoin-degrading enzymes is present in mammals"Biochem.J.. 312. 315-318 (1995)
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[Publications] Sakuraba,H.: "Alcohol : NAD oxdoreductase is present in rat liver peroxisomes"J.Biol.Chem.. 270. 37-40 (1995)
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[Publications] Noguchi,T.: "Comparative Biochemistry of Animal Peroxisomes,(ed.T.Noguchi)"Research Signpost,India. 14 (1997)
