2016 Fiscal Year Annual Research Report
肝炎ウイルス治療後の肝発癌機序とバイオマーカーの同定に関する研究
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15H04809
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| Research Institution | Kanazawa University |
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Principal Investigator |
本多 政夫 金沢大学, 保健学系, 教授 (00272980)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
堀本 勝久 国立研究開発法人産業技術総合研究所, 創薬分子プロファイル研究センター, 副センター長 (40238803)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 癌 / ゲノム / マイクロアレイ / メチル化 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
肝炎ウイルスの治療は進歩したが、肝炎ウイルス治療後にも肝発がんが認められる。肝炎ウイルス治療後ではウイルス制御により、肝炎が抑制された状態であることから、肝がんの発生にはエピゲノム修飾などによる不可逆的な遺伝子発現異常が大きく関わっている可能性がある。本研究は網羅的メチル化解析並びに遺伝子発現解析を行い、肝炎ウイルス治療後の肝発がん機序の解明と肝発がんを予測するバイオマーカーの同定を行うことを目的とした。
平成27年度はC 型慢性肝炎（CH-C）ウイルス学的完全駆除（SVR）例の肝がん例のメチル化解析から、肝発がん関連メチル化遺伝子群を同定した。遺伝子発現解析結果も合わせ肝発癌時に発現上昇し、メチル化の低下を認める遺伝子を数個に絞り込むことができた。それらの遺伝子の組織発現を解析し、興味深いことに血管内皮に発現する遺伝子Gene Xを同定した。Gene Xは膜貫通ドメインを有する機能未知の新規遺伝子であり5-aza-dcによる脱メチル化処理により発現上昇することを確認した。
平成28年度は102例の肝癌手術標本を用いた免疫組織学的染色による発現解析では、Gene Xの発現は非癌部より癌部で強く発現し、Gene Xの発現の高い症例では有意に無再発期間が短かった。Gene XにFlagタグ及びEGFPを繋いだ発現ベクターを構築し、Gene Xを有する組み換えレンチウイルスを作成した。また、Gene Xのin vivoでの機能評価を行うため新規にC57L/B6マウス由来肝癌細胞株（MHCF5）を樹立した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
平成27年度はC 型慢性肝炎（CH-C）ウイルス学的完全駆除（SVR）例の肝がん例のメチル化解析から、肝発がん関連メチル化遺伝子群を同定した。遺伝子発現解析結果も合わせ肝発癌時に発現上昇し、メチル化の低下を認める遺伝子を数個に絞り込むことができた。それらの遺伝子の組織発現を解析し、興味深いことに血管内皮に発現する遺伝子Gene Xを同定した。Gene Xは膜貫通ドメインを有する機能未知の新規遺伝子であり5-aza-dcによる脱メチル化処理により発現上昇することを確認した。
平成28年度は102例の肝癌手術標本を用いた免疫組織学的染色を行い、Gene Xの発現の臨床的意義について検討した。また、Gene X の機能的解析を進めるためGene XにFlagタグ及びEGFPを繋いだ発現ベクターを構築し、Gene Xを有する組み換えレンチウイルスを作成した。さらに、Gene Xのin vivoでの機能評価を行うため新規にC57L/B6マウス由来肝癌細胞株（MHCF5）を樹立した。
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| Strategy for Future Research Activity |
平成29年度は新規に樹立したC57L/B6マウス由来肝癌細胞株（MHCF5）を用いた同系マウス肝癌移植モデルを用いてGene Xのin vivoでの機能評価を行う。MHCF5はHCV-Tgから発生する肝癌組織を用いて我々が新規に樹立した培養細胞であり、同系C57L/B6マウスに皮下移植や脾注肝転移モデルが可能である。また、頻用されるC57L/B6由来遺伝子改変マウスを用いた腫瘍移植実験が可能である。C57L/B6マウス肝よりCD31陽性血管内皮を分離し、Gene X組み換えレンチウイルスにてGene XをトランスダクションしMHCF5と混合してC57L/B6マウスへの腫瘍移植を行う。Gene X過剰発現による血管内皮の増殖、及び腫瘍形成能を評価する。
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[Journal Article] De Novo Emergence of Mesenchymal Stem-Like CD105+ Cancer Cells by Cytotoxic Agents in Human Hepatocellular Carcinoma.2017
Author(s)
Nomura Y, Yamashita T, Oishi N, Nio K, Hayashi T, Yoshida M, Hayashi T, Hashiba T, Asahina Y, Okada H, Sunagozaka H, Takatori H, Honda M, Kaneko S.
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Journal Title
Transl Oncol.
Volume: -
Pages: -
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Branched-chain amino acids prevent hepatic fibrosis and development of hepatocellular carcinoma in a non-alcoholic steatohepatitis mouse model.2017
Author(s)
Takegoshi K, Honda M, Okada H, Takabatake R, Matsuzawa-Nagata N, Campbell JS, Nishikawa M, Shimakami T, Shirasaki T, Sakai Y, Yamashita T, Takamura T, Tanaka T, Kaneko S.
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Journal Title
Oncotarget.
Volume: -
Pages: -
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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[Journal Article] Deficiency of the hepatokine selenoprotein P increases responsiveness to exercise in mice through upregulation of reactive oxygen species and AMP-activated protein kinase in muscle.2017
Author(s)
Misu H, Takayama H, Saito Y, Mita Y, Kikuchi A, Ishii KA, Chikamoto K, Kanamori T, Tajima N, Lan F, Takeshita Y, Honda M, Tanaka M, Kato S, Matsuyama N, Yoshioka Y, Iwayama K, Tokuyama K, Akazawa N, Maeda S, Takekoshi K, Matsugo S, Noguchi N, Kaneko S, Takamura T.
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Journal Title
Nat Med.
Volume: -
Pages: -
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Jagged1 DNA Copy Number Variation Is Associated with Poor Outcome in Liver Cancer.2016
Author(s)
Kawaguchi K, Honda M, Yamashita T, Okada H, Shirasaki T, Nishikawa M, Nio K, Arai K, Sakai Y, Yamashita T, Mizukoshi E, Kaneko S.
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Journal Title
Am J Pathol.
Volume: 186(8)
Pages: 2055-2067
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Post-progression survival and progression-free survival in patients with advanced hepatocellular carcinoma treated by sorafenib.2016
Author(s)
Terashima T, Yamashita T, Takata N, Nakagawa H, Toyama T, Arai K, Kitamura K, Yamashita T, Sakai Y, Mizukoshi E, Honda M, Kaneko S.
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Journal Title
Hepatol Res.
Volume: 46(7)
Pages: 650-656
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Altered gene expression in T-cell receptor signalling in peripheral blood leucocytes in acute coronary syndrome predicts secondary coronary events.2016
Author(s)
Takashima S, Usui S, Kurokawa K, Kitano T, Kato T, Murai H, Furusho H, Oda H, Maruyama M, Nagata Y, Usuda K, Kubota K, Takeshita Y, Sakai Y, Honda M, Kaneko S, Takamura M.
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Journal Title
Open Heart.
Volume: 3(1)
Pages: e000400
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Hepatitis B Virus (HBV) Core-Related Antigen During Nucleos(t)ide Analog Therapy Is Related to Intra-hepatic HBV Replication and Development of Hepatocellular Carcinoma.2016
Author(s)
Honda M, Shirasaki T, Terashima T, Kawaguchi K, Nakamura M, Oishi N, Wang X, Shimakami T, Okada H, Arai K, Yamashita T, Sakai Y, Yamashita T, Mizukoshi E, Kaneko S.
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Journal Title
J Infect Dis.
Volume: 213(7)
Pages: 1096-1106
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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