2015 Fiscal Year Annual Research Report
神経芽腫に対するEngineered Stem Cellによる新規細胞療法の開発
| Project/Area Number |
15H05000
|
|---|
| Research Institution | Kyoto Prefectural University of Medicine |
|---|
Principal Investigator |
田尻 達郎 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (80304806)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
松田 修 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (00271164)
東 真弓 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (10380453)
文野 誠久 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (40405254)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2019-03-31
|
| Keywords | 癌 / 神経芽腫 / 細胞治療 / 分化誘導 / 間葉系幹細胞 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
In VitroでのMSC、NSCの神経芽腫細胞への効果の解析
MSCおよびiPS由来NSC(iNSC)の神経芽腫培養細胞への作用の解析
①ディッシュ内で神経芽腫培養細胞とMSCもしくはiNSCとの共培養を行い、神経芽腫細胞への遊走、分化誘導の解析を行う。神経芽腫分化のマーカーとしてβ-ⅢTubrin、Thyrosine Hydroxylaseを用いて、蛍光免疫染色等を行った。
②MSCもしくはiNSCを培養した培養液を採取し、神経芽腫培養細胞に作用させ、分化傾向を蛍光免疫染色等を用いて解析した。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
MSCもしくはiNSCを培養した培養液を採取し、培養液中のgrowth factor等の蛋白解析をmass spectrometryを用いて行い、神経芽腫分化に関連する因子の同定する研究の前にIn vivoの研究に移行する予定。
|
| Strategy for Future Research Activity |
In VivoでのMSC、NSCの神経芽腫モデルマウスへの効果の解析
MSC、eMSC、iNSCのMYCN-Tgマウスにおける動態および抗腫瘍効果の解析
①MSC、eMSC、iNSCをそれぞれ腹腔内投与もしくは経静脈投与の経路でMYCN-Tgマウスに投与する。１週間後に腫瘍を採取し、免疫染色にてマーカーを同定し、腫瘍への定着（homing）の有無を確認する。
②MSC、eMSC、iNSCを投与した群とPBSを投与したコントロール群の腫瘍を2週間後に採取し、分化度、増殖度の比較を行う。eMSC投与群と他の群の腫瘍におけるMYCN発現の比較をRT-PCRおよびウエスタンブロッティングを用いて行う。また、生存率の比較を行う。
|
