| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では, 原発性胆汁性胆管炎/肝硬変(PBC)では, 「胆管細胞のオートファジー異常が自己抗原の異常表出や免疫炎症機構の制御異常を介して自己免疫性発症機構に関与する」, という仮説を検証し, PBCの病態解明とオートファジー異常の制御による新たなPBC治療法の分子基盤の確立をめざしている。また, 胆管でのオートファジー異常の検出による新しいPBCの病理診断マーカーの開発も目ざした。
本年度は, 胆管上皮細胞のオートファジー異常/ミトコンドリア抗原異常発現の発生機構として, 胆管保護作用機構である”重炭酸アンブレラ”の維持に重要な役割を持つAnion Exchanger 2 (AE2)の関与に着目して検討した。まず, ①PBCとウイルス性肝炎などの対照肝疾患の肝組織を用い, 免疫組織化学的手法で, AE2発現の検討, AE2発現と, オートファジーマーカーLC３, ミトコンドリア抗原, 細胞老化マーカーp16INK4a, p21WAF1/CIp1発現との関連を検討した。また, ②培養胆管細胞を用いて, AE2とオートファジー, 細胞老化, ミトコンドリア抗原発現との関連を検討した。
その結果, ①PBCの傷害胆管ではAE2の発現低下があり,胆管細胞老化, ミトコンドリア抗原PDC-E2の異常発現, オートファジー異常を示すp62/SQSTMの顆粒状蓄積, LC3の顆粒状異常蓄積と局在が一致することが, 二重蛍光免疫染色で明らかとなった。また, ②培養胆管細胞で, siRNAを用いてAE2発現をノックダウンすると, オートファジー異常, ミトコンドリア抗原異常発現, 細胞老化が誘導された。また, 酸化ストレス, 疎水胆汁酸GCDCなどで誘導した老化胆管細胞では, AE2発現低下を認めた。PBCの胆管病変の発生機構には, AE2発現の低下が密接に関連することが示唆された。
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