2015 Fiscal Year Research-status Report
悪性中皮腫におけるがん幹細胞の生物学的特性の解明と治療法への応用
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15K08370
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| Research Institution | Hyogo Medical University |
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Principal Investigator |
佐藤 鮎子 兵庫医科大学, 医学部, 講師 (20419823)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
辻村 亨 兵庫医科大学, 医学部, 教授 (20227408)
篠原 義康 兵庫医科大学, 医学部, 助教 (60723509)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 悪性中皮腫 / がん幹細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究は、中皮腫細胞株に人工多能性幹細胞（iPS細胞）誘導因子を遺伝子導入して人工中皮腫幹細胞の作製を試み、人工中皮腫幹細胞の生物学的特性を糸口にして、中皮腫幹細胞およびその増殖・生存に関連する分子を標的とした治療法の開発を目指すものである。本年度は、その第一歩として、免疫不全マウスに造腫瘍能を示す３種類の中皮腫細胞株を遺伝子導入細胞として選別し、遺伝子導入に必要なマウスレトロウイルス受容体を発現させた。また、iPS細胞誘導因子（OCT3/4, SOX2, KLF4, c-MYC）の遺伝子を導入するマウスレトロウイルスベクターを準備した。更に、悪性胸膜中皮腫の臨床検体を用いて、有用な中皮腫幹細胞マーカーの同定を目的として、化学療法後に残存する抗がん剤抵抗性の腫瘍細胞で強く発現する分子を探索し、細胞接着分子CD146の発現強度が悪性胸膜中皮腫の悪性度に相関すること、再発症例においてCD146とは別の細胞接着分子の発現が観察されることを見出した。そこで、セルブロックを用いた免疫染色により、この細胞接着分子を発現する細胞が一部に含まれていることを確認した中皮腫細胞株をソーティングして陽性群と陰性群を分取し、それぞれの群におけるiPS細胞誘導因子の発現をリアルタイムPCR法で調べた。OCT3/4, SOX2, KLF4は、陽性群において強い発現が検出されたが、陰性群ではほとんど検出されなかった。この細胞接着分子は中皮腫幹細胞マーカーとして有用であると考えられることから、今後は、陰性群にマウスレトロウイルスを用いてiPS細胞誘導因子を遺伝子導入し、この細胞接着分子やCD146をマーカーとして人工中皮腫幹細胞の作製を進める。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
iPS細胞誘導因子を導入するための中皮腫細胞株の選別、レトロウイルスベクターの準備、新たな中皮腫幹細胞マーカーの同定を行い、人工中皮腫幹細胞の作製のための実験環境を整備したが、人工中皮腫幹細胞の樹立には至っていない。
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| Strategy for Future Research Activity |
中皮腫細胞株にiPS細胞誘導因子を遺伝子導入し、得られた初期化細胞から種々のマーカー発現などに基づいて、がん幹細胞の候補を分取し、自己複製能や造腫瘍能などの特徴を示すクローンを人工中皮腫幹細胞として単離する。これらの細胞を免疫不全マウスの皮下および胸腔内に移植して、腫瘍の組織像、浸潤・転移能、化学療法に対する感受性などを病理組織学的に解析する。また、中皮腫のがん幹細胞との関連が示唆される分子について、中皮腫の腫瘍検体を用いて臨床病理学的な検討を行うとともに、中皮腫細胞株および人工中皮腫幹細胞を用いてその機能を解析する。
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| Causes of Carryover |
主に消耗品の購入に使用したが、使用を計画していた物品（消耗品）を変更したこと、物品の価格が変更されていたことなどにより、18,796円の次年度使用額が生じた。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
次年度使用額については、研究を円滑に進めるための消耗品の購入に当てる。
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Research Products
(7 results)
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[Presentation] NF2遺伝子関連蛋白Merlinの染色性と中皮腫の腫瘍特性の関連2015
Author(s)
栗林康造, 家城隆次, 大搗泰一郎, 金村晋吾, 柴田英輔, 政近江利子, 神谷 瞳, 三上浩司, 寺田貴普, 近藤展行, 佐藤鮎子, 清水重喜, 長谷川誠紀, 辻村 亨, 中野孝司
Organizer
第56回日本肺癌学会学術総会
Place of Presentation
パシフィコ横浜（横浜）
Year and Date
2015-11-28
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[Presentation] 中皮腫診断の現状と将来2015
Author(s)
辻村 亨, 佐藤鮎子, 篠原義康, 工藤朝雄, 今橋祐喜, 清水重喜, 鍋島一樹, 長谷川誠紀, 中野孝司
Organizer
第56 回日本臨床細胞学会総会春期大会
Place of Presentation
松江テルサ（松江）
Year and Date
2015-06-13
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