プロテオミクスに基づく新規の抗肝炎ウイルス戦略

2016 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 15K08493
• Research Institution: University of Yamanashi
• Principal Investigator: 森石 恆司 山梨大学, 総合研究部, 教授 (90260273)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2018-03-31
• Keywords: C型肝炎 / B型肝炎 / HCV / HBV / 抗ウイルス化合物

Outline of Annual Research Achievements

前年度Protein-Protein interaction スクリーニング系の構築を行い、HCVコアタンパクと機能的に結合するPA28γの評価系を使っていくつかのHCV阻害剤候補を同定した。また、HCVコアによる膜蛋白質2ハイブリットで同定された膜内蛋白質分解酵素に対するプロテアーゼ阻害剤をスクリーニングし、抗HCV剤候補としてLY411575を同定し、ウイルス産生に阻害効果があることを明らかにした。LY411575はウイルスコア蛋白質の成熟を抑制し、コアの分解を促進することで、ウイルス粒子形成を阻害することが示唆された。レプリコン細胞系および培養細胞感染系に対して抗ウイルス効果を検討した結果、この化合物はウイルス複製に対して効果は低く、ウイルス粒子産生に抑制効果を示した。また、抗HBV複製阻害剤(NS5A阻害剤）Daclatasvirの複製阻害効果に対して相乗効果は認められず、ウイルス産生阻害効果に相乗効果があった。さらに、LY411575はウイルス感染による酸化ストレスを軽減し、がん化に関与する因子の産生増加を軽減した。以上のことから、抗ウイルス活性だけでなく、抗がん化作用も期待できることが分かった。さらにCDK阻害剤をHBV感染培養系でスクリーニングし、p-TEFb阻害剤に抗HBV活性があることを見いだした。HBV感染培養細胞系においてウイルスRNA、粒子内DNA、ウイルス感染粒子の産生を有意に阻害した。また、ウイルスを持続的に産生する細胞系でウイルス産生を有意に阻害した。さらに、ヒト肝臓キメラマウスにおいて、in vivoにおけるETVの抗ウイルス活性を増強した。この結果は新たな抗HBV剤開発への貢献に繋がると思われる。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

ほぼ順調に研究は進呈しており、現時点で問題はない。

Strategy for Future Research Activity

研究計画に変更はなく、同定した抗ウイルス化合物および標的因子の解析を通じ、新規抗肝炎ウイルス剤開発に繋げる。

Research Products

• [Journal Article] Hepatocyte Factor JMJD5 Regulates Hepatitis B Virus Replication through Interaction with HBx (2016)
  • Author(s): Kouwaki T, Okamoto T, Ito A, Sugiyama Y, Yamashita K, Suzuki T, Kusakabe S, Hirano J, Fukuhara T, Yamashita A, Saito K, Okuzaki D, Watashi K, Sugiyama M, Yoshio S, Standley DM, Kanto T, Mizokami M, Moriishi K, Matsuura Y.
  • Journal Title: Journal of Virology Volume: 7 Pages: 3530-3542
  • DOI: 10.1128/JVI.02776-15.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Inhibitory effect of CDK9 inhibitor FIT-039 on hepatitis B virus propagation (2016)
  • Author(s): Tanaka T, Okuyama-Dobashi K, Murakami S, Chen W, Okamoto T, Ueda K, Hosoya T, Matsuura Y, Ryo A, Tanaka Y, Hagiwara M, Moriishi K.
  • Journal Title: Antiviral Research Volume: 133 Pages: 156-64
  • DOI: 10.1016/j.antiviral.2016.08.008.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Inhibitory effect of presenilin inhibitor LY411575 on maturation of hepatitis C virus core protein, production of the viral particle and expression of host proteins involved in pathogenicity. (2016)
  • Author(s): Otoguro T, Tanaka T, Kasai H, Yamashita A, Moriishi K.
  • Journal Title: Microbiol Immunol. Volume: 60 Pages: 740-753
  • DOI: 10.1111/1348-0421.12448
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Presentation] Cross-species compatibility of hepacivirus 5’ untranslated region (2016)
  • Author(s): Tanaka T, Otoguro T, Kasai H, Yamashita A, Okuyama-Dobashi K, Moriishi K
  • Organizer: 第64回日本ウイルス学会総会
  • Place of Presentation: 札幌コンベンションセンター（札幌白石区）
  • Year and Date: 2016-10-23 – 2016-10-25
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] CDK9 inhibitor FIT-039 suppresses HBV propagation (2016)
  • Author(s): Moriishi K, Tanaka T, Okuyama-Dobashi K, Chen W, Okamoto T, Ueda K, Hosaya T, Matsuura Y, Ryo A, Tanaka Y, Hagiwara M
  • Organizer: 第64回日本ウイルス学会総会
  • Place of Presentation: 札幌コンベンションセンター（札幌白石区）
  • Year and Date: 2016-10-23 – 2016-10-25
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Hepatitis C virus infection impairs mono-ubiquitination of histone H2A and activates expression of homeobox genes. (2016)
  • Author(s): Kasai H, Tanaka T, Yamashita A, Dobashi-Okuyama K, Moriishi K.
  • Organizer: 第64回日本ウイルス学会総会
  • Place of Presentation: 札幌コンベンションセンター（札幌白石区）
  • Year and Date: 2016-10-23 – 2016-10-25
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Establishment of highly HBV-permissible HepG2 cell line to facilitate screening of antiviral compounds (2016)
  • Author(s): Otoguro T, Tanaka T, Chen W, Kasai H, Yamashita A, Okuyama-Dobashi K, Moriishi K
  • Organizer: 第64回日本ウイルス学会総会
  • Place of Presentation: 札幌コンベンションセンター（札幌白石区）
  • Year and Date: 2016-10-23 – 2016-10-25
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Inhibition of HBV propagation by treatment with CDK9 inhibitor FIT-039 (2016)
  • Author(s): Tanaka T, Okuyama-Dobashi K, Chen W, Okamoto T, Ueda K, Hosaya T, Matsuura Y, Ryo A, Tanaka Y, Hagiwara M and Moriishi K
  • Organizer: 2016 International HBV meeting
  • Place of Presentation: ソウル、韓国
  • Year and Date: 2016-09-21 – 2016-09-24
  • Int'l Joint Research
• [Book] Structural Proteins of HCV and Biological Functions in "Hepatitis C virus I: Cellular and Molecular Virology" (2016)
  • Author(s): Moriishi K, Matsuura Y, (Ed. by Miyamura T, Lemon SM, Walker CM, Wakita T
  • Total Pages: 23
  • Publisher: Springer
• [Remarks] 山梨大学大学院総合研究部医学域基礎医学系微生物学講座
  • URL: http://www.med.yamanashi.ac.jp/clinical_basic/microbio/Microbiology_Yamanashi_Uni_Japanese/Home.html