次世代ハイスループット・レパトア解析による自己免疫性血液疾患の病態解明と標的治療

2015 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 15K08639
• Research Institution: Akita University
• Principal Investigator: 廣川 誠 秋田大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (50241667)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 鈴木 隆二 独立行政法人国立病院機構(相模原病院臨床研究センター), その他部局等, その他 (70373470) ; 藤島 直仁 秋田大学, 医学部, 講師 (70422152)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2018-03-31
• Keywords: ハイスループット・レパトア解析 / 次世代シーケンサー / T細胞抗原受容体 / B細胞抗原受容体 / 特発性血小板減少性紫斑病 / 赤芽球癆 / リンパ系腫瘍

Outline of Annual Research Achievements

１．本研究の目的と研究計画．本研究の目的は次世代シーケンサーとバイオ・インフォマティクスを用いた網羅的次世代T細胞およびＢ細胞抗原受容体レパトア解析技術を用いて、ヒト自己免疫性血液疾患における病的T細胞・Ｂ細胞クローンを同定し、自己免疫性血液疾患の免疫病態を明らかにすることである。具体的計画・方法は、第一に、網羅的リンパ球抗原受容体解析技術のvalidationを目的として、リンパ系腫瘍（慢性リンパ性白血病、大顆粒リンパ球性白血病等）の末梢血におけるリンパ球クローンの同定と治療にともなうクローンの消長を検討すること、第二に、特発性血小板減少性紫斑病（ITP）症例におけるB細胞抗原受容体のレパトア解析を行い、症例を超えたpublicな免疫グロブリンの構造の有無について検討すること、第三に、赤芽球癆における病的T細胞・B細胞クローンの同定を試み、HLAアリルタイプとの関連について検討することである。
２．研究環境の整備について．本研究で用いる次世代ハイスループット・T細胞・B細胞抗原受容体レパトア解析に必要な次世代シーケンサーは共同研究者の鈴木らの研究室に設置されており、また、adaptor-ligation PCR法、T細胞・B細胞抗原受容体の遺伝子データを解析するためのソフトウエアは既に開発・確立されている。フローサイトメトリーおよびHLAアリルタイピングのための解析は秋田大学で可能となっている。検体の保存に必要な環境が整備された。
３．医学倫理学的事項について、本研究計画は平成28年1月28日付けで秋田大学大学院医学系研究科研究審査委員会において承認された。
４．研究打ち合わせについて．平成27年7月8日秋田大学において共同研究者の鈴木と本研究の打ち合わせを行った。平成28年3月15日秋田大学において秋田大学医学部附属病院血液内科診療グループの医師らと研究打ち合わせを行った。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

本研究の遂行に必要な技術は確立され研究環境は整備されているが、研究計画書の作成ならびに研究計画の審査・承認に時間を要した結果、検体集積に遅れを生じたことが本研究の進捗が遅れている主な原因である。

Strategy for Future Research Activity

１．本研究への参加者リクルートメントの推進．本研究が対象とする特発性血小板減少性紫斑病、慢性赤芽球癆、リンパ系腫瘍症例の診療担当医への協力を積極的に依頼する。また、研究協力施設を増やして研究協力者の増加を目指す。
２．特発性血小板減少性紫斑病におけるT細胞抗原受容体・B細胞抗原受容体レパトア解析の推進．比較的症例数の多い特発性血小板減少性紫斑病およびリンパ系腫瘍の検体集積を積極的に進め、T細胞抗原受容体・B細胞抗原受容体レパトアの解析とHLAアリルタイプ、臨床データの集積を継続する。

Causes of Carryover

検体集積に遅れが生じているため、ハイスループット・レパトア解析に使用する予定であった未使用の消耗品費が残っていることが次年度使用額が生じた主な要因である。

Expenditure Plan for Carryover Budget

当該助成金は平成28年度に消耗品費として全て使用する予定である。

Research Products

• [Journal Article] RCA Collaborative Study Group. Long-term outcome of patients with acquired chronic pure red cell aplasia (PRCA) following immunosuppressive therapy: a final report of the nationwide cohort study in 2004/2006 by the Japan PRCA collaborative study group. (2015)
  • Author(s): Hirokawa, M., Sawada, K., Fujishima, N., Teramura, M., Bessho, M., Dan, K., Ts urumi, H., Nakao, S., Urabe, A., Fujisawa, S., Yonemura, Y., Kawano, F., Oshimi, K., Sugimoto, K., Matsuda, A., Karasawa, M., Arai, A., Komatsu, N., Harigae, H., Omine, M., Ozawa, K., Kurokawa, M.
  • Journal Title: Br J Haematol Volume: 169 Pages: 879-886
  • DOI: 10.1111/bjh.13376
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Functional ana- lysis of free fatty acid receptor GPR120 in human eosinophils: implications in metabolic homeostasis. (2015)
  • Author(s): Konno, Y., Ueki, S., Takeda, M., Kobayashi, Y., Tamaki, M., Moritoki, Y., Oyamada, H., Itoga, M., Kayaba, H., Omokawa, A., Hirokawa, M.
  • Journal Title: PLoS One Volume: 10 Pages: e0120386
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0120386
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] G-Protein-Coupled Estrogen Receptor Agonist Suppresses Airway Inflammation in a Mouse Model of Asthma through IL-10. (2015)
  • Author(s): Itoga, M., Konno, Y., Moritoki, Y., Saito, Y., Ito, W., Tamaki, M., Kobayashi, Y., Kayaba, H., Kikuchi, Y., Chihara, J., Takeda, M., Ueki, S., Hirokawa, M.
  • Journal Title: PLoS One Volume: 10 Pages: e0123210
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0123210
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] 再生不良性貧血と赤芽球癆の病態と治療 (2015)
  • Author(s): 廣川 誠，藤島直仁，面川 歩，植木重治
  • Journal Title: 日本内科学会雑誌 Volume: 104 Pages: 1405-1413
• [Journal Article] 赤芽球癆の診断と治療 (2015)
  • Author(s): 廣川 誠
  • Journal Title: 臨床血液 Volume: 56 Pages: 1922-1931
  • DOI: 10.11406/rinketsu.56.1922
• [Presentation] Long-term outcome of patients with acquired chronic PRCA following immunosuppressive therapy (2015)
  • Author(s): Hirokawa, M., Sawada, K., Fuishima, N., Teramura, M., Bessho, M., Dan, K., Tsurumi, H., Nakao, S., Urabe, A., Fujisawa, S., Yonemura, Y., Kawano, F., Oshimi, K., Sugumoto, K., Matsuda, A., Karasawa, M., Arai, A., Komatsu, N., Harigae, H., Omine, M., Ozawa, K., Kurokawa, M.
  • Organizer: 第77回日本血液学会学術集会
  • Place of Presentation: 金沢
  • Year and Date: 2015-10-16 – 2015-10-18
• [Presentation] 赤芽球癆の診断と治療（教育講演） (2015)
  • Author(s): 廣川 誠
  • Organizer: 第77回日本血液学会学術集会
  • Place of Presentation: 金沢
  • Year and Date: 2015-10-16 – 2015-10-18
  • Invited
• [Presentation] TLR9 signaling exerts HPS in BMT mice and is effectively treated through TNF-α inhibition (2015)
  • Author(s): Liu, J., Guo, Y., Hirokawa, M., Takahasi, N., Ubukawa, K., Kobayashi, I., Minamiya, Y., Tezuka, H., Onai, N., Ohteki, T., Sawada, K.
  • Organizer: 第77回日本血液学会学術集会
  • Place of Presentation: 金沢
  • Year and Date: 2015-10-16 – 2015-10-18
• [Presentation] Impact of donor source on allogeneic HSCT outcomes for patients with CMML. (2015)
  • Author(s): Itonaga, H., Aoki, K., Aoki, J., Ishiyama, K., Ishikawa, T., Uchida, N., Hoshino, T., Ohashi, K., Kurokawa, M., Ozawa, Y., Matsuoka, K., Yuiri, T., Hirokawa, M., Morishima, Y., Kato, K., Atsuta, Y., Miyazaki, Y.
  • Organizer: 第77回日本血液学会学術集会
  • Place of Presentation: 金沢
  • Year and Date: 2015-10-16 – 2015-10-18
• [Presentation] Influence of CYP3A5 gene polymorphisms on pharmacokinetics of modified-release tacrolimus. (2015)
  • Author(s): Yamashita, T., Fujishima, N., Miura, M., Niioka, T., Abumiya, M., Nara, M., Fujishima, M., Kameoka, Y., Hirokawa, M., Takahashi, N.
  • Organizer: 第77回日本血液学会学術集会
  • Place of Presentation: 金沢
  • Year and Date: 2015-10-16 – 2015-10-18
• [Book] 血液専門医テキスト改訂第2版 (2015)
  • Author(s): 廣川 誠
  • Total Pages: 584(分担pp.196-198)
  • Publisher: 南江堂
• [Book] 今日の治療指針2015 (2015)
  • Author(s): 廣川 誠
  • Total Pages: 1973(分担pp.650-651)
  • Publisher: 医学書院
• [Book] 最新ガイドライン準拠血液疾患診断・治療指針 (2015)
  • Author(s): 廣川 誠
  • Total Pages: 560(分担pp.214-218)
  • Publisher: 中山書店
• [Book] ブラッシュアップ骨髄不全症 (2015)
  • Author(s): 廣川 誠
  • Total Pages: 193(分担pp.74-85)
  • Publisher: 中外医学社
• [Book] 免疫症候群 第2版Ⅰ（その他の免疫疾患を含めて） (2015)
  • Author(s): 廣川 誠，澤田賢一
  • Total Pages: 931(分担pp.277-280)
  • Publisher: 日本臨床社