日本人多発性硬化症の全ゲノム関連解析に基づくγδT細胞と自然免疫を標的とした治療

2016 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 15K09341
• Research Institution: Kyushu University
• Principal Investigator: 松下 拓也 九州大学, 大学病院, 講師 (00533001)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 山崎 亮 九州大学, 医学研究院, 准教授 (10467946)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2018-03-31
• Keywords: 多発性硬化症 / 自然免疫 / マクロファージ

Outline of Annual Research Achievements

34例の未治療のMS患者と22例の健常者で末梢血のγδT細胞受容体の使用頻度に差がないかをフローサイトメトリー法で検討した。その結果、MS患者では健常者に比して、有意にVδ1+γδT細胞が増加し（p = 0.001）、Vδ2+ γδT細胞、なかでもVδ2+Vγ9+T細胞が有意に減少していることが示された（p = 0.001）。Vδ1+/Vδ2+γδT細胞比は、総合障害度と有意な正相関（r = 0.4728, p = 0.0170）を、そして制御性T細胞の頻度と有意な負相関を示した（r = -0.5927, p = 0.0037）。さらに、TCR領域の欠失型CNVを有するMS15例、欠失型CNVを有さないMS15例、健常対照7例で、T細胞受容体α、β、γ、δ鎖のV、D、J遺伝子の使用頻度を、現在解析中である。Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis（MAP）のオーバーラッピングペプチドを抗原とするELISA法により、ヒトT細胞受容体γ鎖のC領域と交差反応するMAP295-303のみに対して抗体陽性率がMS全体で11/120（9.2%）、健常対照で1/50（2.0%）で、MS症例での陽性者は、有意にMSの疾患感受性遺伝子アリルであるHLA-DRB1*15:01アリルの保有率が健常対照より高かった（p=0.0298）。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

多発性硬化症患者におけるγδT細胞の機能分画を明らかにし、MAPペプチドとの交差反応、HLAとの関連についての解析が行われた．

Strategy for Future Research Activity

ヒト末梢血からγδT細胞を誘導し、MAPペプチド刺激下でのサイトカイン発現のパターンを明らかにする。これらのパターンをTCR領域の欠失型CNVの有無において比較する。顆粒球・マクロファージでのZBTB20発現をノックアウトしたマウスでのexperimental autoimmune encehalomyelitis（EAE）導入を行い、wild typeとの比較を行う。