乳幼児アトピー性皮膚炎の発症に関わるmicroRNAの解析

2015 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 15K09638
• Research Institution: Chiba University
• Principal Investigator: 井上 祐三朗 千葉大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (00456063)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2018-03-31
• Keywords: アトピー性皮膚炎 / microRNA / 出生コホート

Outline of Annual Research Achievements

本研究は、出生コホート研究によって発症を観察できる乳幼児アトピー性皮膚炎に焦点を当て、microRNA(miRNA)発現の個体差による遺伝子転写後制御の違いから、乳幼児アトピー性皮膚炎の新たな発症病態を解明することを目的としている。
平成27年度は、先行研究において1才時のアトピー性皮膚炎の発症と関連していた3種類のmicroRNA(ADmiRs-HR)の発現を、現在進行中の「一般小児出生コホート」の臍帯血および生後９か月の血清、「アレルギーハイリスク児出生コホート」の1才および2才の血清で検討する予定であったが、さらに「アレルギーハイリスク児出生コホート」の３才の血清の解析も可能となったため、追加検討することにした。
当初計画よりもサンプル数を増やしたため、平成27年度は上記の全ての血清からのRNA抽出およびmiRNAのcDNA合成を行った。Real-time PCRによるADmiRs-HR発現の解析は、平成28年度に行う予定である。
医師によるアトピー性皮膚炎の診断と重症度評価は終了し、アレルゲン特異的IgE検査などの臨床データの収集は終了している。「アレルギーハイリスク児出生コホート」では、1才時の評価対象269名中アトピー性皮膚炎の児は41名(15.2%)、平均血清総IgE 45.5±84.4 IU/ml、平均ダニ特異的IgE 0.47±1.69 U/ml、2才時の評価対象256名中アトピー性皮膚炎の児は39名(15.2%)、平均血清総IgE 126±328 IU/ml、平均ダニ特異的IgE 7.20±51.6 U/mlであった。平成28年度にADmiRs-HR発現との関連を検討する予定である。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

平成27年度は、「一般小児出生コホート」の臍帯血および生後９か月の血清、「アレルギーハイリスク児出生コホート」の1才および2才の血清の、microRNA発現を検討する予定であったが、さらに「アレルギーハイリスク児出生コホート」の３才の血清が加わったため、全てのサンプルのcDNA合成まで行い、microRNA発現は平成28年度におこなうことになった。

Strategy for Future Research Activity

出生コホート研究のサンプルを用いて、1才のアトピー性皮膚炎の発症と関連することが明らかになったmicroRNAが、アトピー性皮膚炎の病態に重要な細胞において、遺伝子発現および細胞機能に関わるかを検討する。解析する細胞としては、表皮角化細胞、皮膚線維芽細胞、樹状細胞を予定している。標的遺伝子の発現はreal-time PCRにより解析する。細胞機能の変化の検討は、使用する細胞により異なるが、例えば皮膚線維芽細胞からのTGF-βの発現量であれば、ELISAによる測定および産生されるTGF-βにより制御性T細胞の誘導能を解析する。

Research Products

• [Presentation] Association between serum microRNA expression in maternal blood or in cord blood and the development of atopic dermatitis at one year of age (2015)
  • Author(s): Y. Inoue, T. Yamamoto, F. Yamaide, Y. Morita, T. Nakano, T. Arima, H. Kojima, N. Shimojo, S. Ochiai, A. Eguchi , C. Mori
  • Organizer: 第64回日本アレルギー学会学術大会
  • Place of Presentation: グランドプリンスホテル新高輪（東京都・港区）
  • Year and Date: 2015-05-26 – 2015-05-28