Cancer vaccine with Th1 inducing DC through Notch ligand Dll4

2017 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 15K09659
• Research Institution: Fukushima Medical University
• Principal Investigator: 望月 一弘 福島県立医科大学, 医学部, 講師 (30448633)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 佐野 秀樹 福島県立医科大学, 医学部, 准教授 (20448632) ; 小林 正悟 福島県立医科大学, 医学部, 助教 (30566849) ; 菊田 敦 福島県立医科大学, 医学部, 教授 (40224894) ; 橋本 浩一 福島県立医科大学, 医学部, 准教授 (50322342)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2018-03-31
• Keywords: 癌免疫療法 / 活性化T細胞療法 / 癌ワクチン療法

Outline of Annual Research Achievements

１）野生型B6マウスの大腿骨・脛骨・骨盤骨から骨髄単核球を分離した後、マウスFlt3Lを含んだ培養液にて培養した。９日目にLPS+R848刺激にてNotch ligand Dll4を高発現した活性化樹状細胞（Dll4hiDC）を誘導した。同Dll4hiDCの活性化時に腫瘍ライセートを添加し腫瘍細胞特異的な抗原提示を可能とした。
２）上記Dll4hiDCを各種癌細胞（B16, EG7, C1498)を皮下接種して作成した担癌マウスの腫瘍内に直接投与した所、複数のマウスで癌細胞の消退や腫瘍増殖抑制効果が確認された。しかしながら、いずれの担癌マウスモデルでもDll4hiDCワクチン投与により一様に全てのマウスに有効との結果は得られず、個体差による影響を排除し得なかった。
３）そこで、Dll4hiDCを用いて、混合リンパ球培養法により体外にてリンパ球を活性化し、同活性化リンパ球を、B16F1細胞をあらかじめ側腹部に接種した坦癌マウスの腫瘍内に直接投与した所、全てのマウスで一様に抗腫瘍効果による腫瘍退縮が得られた。
４）上記体外活性化リンパ球療法が、高悪性度のB16F10細胞を皮下接種した担癌マウスでも一様に腫瘍増殖抑制効果が見られた。
５）上記の体外活性化リンパ球を担癌マウスの腫瘍内に直接投与し、24時間後に腫瘍を切除し、腫瘍内に浸潤しているリンパ球を精査した。その結果、コントロール群に比較して、治療群では、投与したリンパ球のみならず、内因性のリンパ球も強く腫瘍内に浸潤し、活性化していることが確認された。