The elucidation for the suppressive effect of thrombomodulin in liver ischemia and reperfusion injury

2018 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 15K10041
• Research Institution: The Tazuke Kofukai
• Principal Investigator: 寺嶋 宏明 公益財団法人田附興風会, 医学研究所 第1研究部, 研究主幹 (40314215)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 岡島 英明 京都大学, 医学研究科, 准教授 (20308604) ; 内田 洋一朗 公益財団法人田附興風会, 医学研究所 第1研究部, 主任研究員 (30597745)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: トロンボモジュリン / 肝虚血再灌流障害 / D1分画 / HMGB-1 / TLR-4

Outline of Annual Research Achievements

リコンビナントトロンボモジュリン(rTM)は、播種性血管内凝固異常症の標準治療薬であり、抗炎症作用を持つことが報告されている。我々は肝虚血再灌流障害（Ischemia and Reperfusion Injury：IRI)におけるrTMの抗炎症作用について解明している。
rTMがもつ肝IRIに対する抑制メカニズムに関して、Toll-like Receptor4（TLR-4)に焦点を当てた解析を行ない、その成果を国際学会誌（American journal of transplantation誌：17:69-80, 2017）に報告した。平成30年度(2018年)は、国際学会におけるWalter Brendel awarded sessionにて口演発表に至った。
次の解析として、TMの分画に着目し、抗炎症作用を有するとされるdomain1に焦点を置いてdomain1分画製剤(rTMD1)を用いた実験を行なっている。
rTMD1製剤の純度調整に時間を要したが、マウス肝IRIモデルにおけるrTMD1投与のIRI抑制効果を確認した。rTMD1投与群と非投与群における肝機能障害、肝組織中の炎症性サイトカイン発現、アポトーシス誘導有無などを検討し、TLR-4ノックアウトマウスを用いてTLR-4との関連性を検討した。さらに、in vitroにおけるrTMD1とTLR-4経路との関連性を検討した。
rTMD1と炎症関連タンパク質High-mobility group box 1(HMGB-1)との結合評価を明らかにするために、①Biacore system（分子間相互作用解析装置）②免疫沈降法を用いた2つの方法で検討している。①での結合性につき他のdomain分画との比較検討を行ない、現在②による検証に、再現性を含めて時間を要している。

Research Products

• [Presentation] Thrombomodulin suppresses inflammatory damage due to liver ischemia and reperfusion injury in mice in TLR-4 dependent manner (2018)
  • Author(s): Kentaro Kadono,Yoichiro Uchida, Akimori Miki, Ryo Ohno, Tomoyuki Miyauchi, Tomohiro Okamoto, Ryo Kamimura, Masashi Horiguchi, Meiki Fukuda, Takeshi Watanabe, Shugo Ueda, Hiroaki Terajima
  • Organizer: The 53rd Congress of the European Society for Surgical Research
  • Int'l Joint Research