2015 Fiscal Year Research-status Report
マイクロRNAによる食道癌の抗がん剤感受性予測システムの確立
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15K10084
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| Research Institution | Tohoku University |
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Principal Investigator |
齋木 由利子 東北大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (80311223)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
小川 武則 東北大学, 大学病院, 講師 (50375060)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | タキサン耐性 / マイクロRNA |
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| Outline of Annual Research Achievements |
①食道癌のパクリタキセル耐性株(RTE-1P)および親株(TE-1)から、MirVana miRNA Isolation kitを用いて、micorRNAを抽出した(2サンプルずつ）。その後、AgilentのSurePrint G3(Human v16) microarray kitを用いて、網羅的なmicroRNAの発現解析を行った。GeneSpring softwareを用いて、T Test (unpaired)により、有為に変化しているマイクロRNA９種類を同定した（miR-146b-5p,miR-32, miR-362-3p, miR-503, miR-517a, miR-517c, miR-521, miR-9, miR-99a)。
②樹立したタキサン耐性株は、ABCB1蛋白が高発現していることがわかったため、ABCB1の発現に、エピジェネティック修飾が関連しているかどうか検討した。ABCB1のプロモーター領域のCpGアイランドのメチル化の状態をバイサルファイトシークエンスにて調べたが、親株および耐性株で有意な差が認められなかった。また、ABCB1の発現に対するＤＮＭＴ阻害剤やＨＤＡＣ阻害剤の影響も限定的であった。ABCB1の発現の制御の機構については、今後さらに検討する必要があると考えられた。③頭頸部がん患者の血清からエクソソームを抽出し、シスプラチン感受性予測因子miR-34aの定量を試みたが、いずれも検出感度以下であった(4例）。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
①食道がん細胞株を用いた検討は順調に進展し、タキサン感受性マイクロRNAの候補を同定することができた。
②臨床検体に関しては、十分な数がまだ収集できていないため、検討がすすんでいない。
③また、頭頸部がん患者の血清エクソソームを用いた検討では、miR-34aの検出ができなかったため、検討がすすんでいない。
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| Strategy for Future Research Activity |
①同定した候補マイクロRNAについて、検討をすすめる。
②食道がんのサンプルの収集を急ぐ。
③血清エクソソームの検討では、感度をあげることが必要である。とくにがん由来のエクソソームを濃縮する方法を考えたい。
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| Causes of Carryover |
キャンペーン品を購入したため、余剰が生じた。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
研究用消耗品の購入に当てたい。
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