2017 Fiscal Year Annual Research Report
Identification and clarification with stem cell markers of real invasive and metastatic cancer cell under cancer cell competition.
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15K10108
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| Research Institution | Kagoshima University |
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Principal Investigator |
喜多 芳昭 鹿児島大学, 医学部・歯学部附属病院, その他(移行) (30570692)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
盛 真一郎 鹿児島大学, 医歯学域附属病院, 助教 (00620519)
奥村 浩 鹿児島大学, 医学部・歯学部附属病院, 助教 (10398282)
内門 泰斗 鹿児島大学, 医歯学域附属病院, 特任准教授 (30464465)
馬場 研二 鹿児島大学, 附属病院, 医員 (30642615) [Withdrawn]
夏越 祥次 鹿児島大学, 医歯学域医学系, 教授 (70237577)
石神 純也 鹿児島大学, 医歯学総合研究科, 客員研究員 (90325803)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 幹細胞マーカー / 共培養 / Ｎｏｔｃｈ / マイクロRNA |
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| Outline of Annual Research Achievements |
①幹細胞マーカー発現の膵臓癌細胞株Capan-1のCD133高・低発現株とEpidermoid癌細胞株であるKB cellにTP高発現させたKB/TP cellで共培養を行い，マイクロアレイを用いた網羅的遺伝子解析を行い，Notch signalingを司る遺伝子群が著明に変化していることが判明した．
②上記より，正常組織の分化に関与すると同時に，様々な固形腫瘍においては血管新生の制御および腫瘍増殖に関与していると報告されているNotch1の発現に注目し，食道扁平上皮癌の手術切除標本を用いて解析することとし，腫瘍におけるNotch1発現が，腫瘍の臨床病理学的因子ならびに生命予後と関連することが明らかとなった．さらに腫瘍先進部で間質に接する部分での腫瘍細胞の形態と核におけるNotch1発現パターンが大きく3つに分類でき，この分類の1つはさらに強く腫瘍の臨床病理学的因子ならびに生命予後と関連することを見出すことが出来た。
③Notch1とNotch3が互いに作用することで腫瘍の浸潤・転移に最も密に関連すると考えられる腫瘍先進部がEMTを起こし癌幹細胞性を所有することを証明した．
④並行して、Non-coding RNAであるmicro RNAに関するマイクロアレイと次世代シークエンサー解析も行い，有力な細胞競合に関わるmicro RNAを抽出した（miR 375，pre-miR-150，miR-217，miR-216 cluster，miR-148a）．おのおののmicroRNAの臨床サンプルでの発現確認，標的遺伝子の検索，ルシフェラーゼアッセイによるmRNA抑制確認，機能解析まで行った．
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