2015 Fiscal Year Research-status Report
独自の圧負荷装置を用いた椎間板細胞のオートファジー機構の解明と制御方法の確立
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15K10415
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| Research Institution | Kyoto Prefectural University of Medicine |
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Principal Investigator |
池田 巧 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (40453120)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
三上 靖夫 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (80360030)
沢田 光思郎 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (40460555)
長江 将輝 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (60604303)
外村 仁 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (70604304)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | オートファジー / 椎間板細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
白色家兎の椎間板組織から髄核細胞、線維輪細胞、終板軟骨細胞を単利子、単層培養、三次元培養を行った。また、椎間板組織の器官培養も行った。
現在、種々の周期、時間、強さ(1-30MPa)の静水圧負荷を行い、オートファジー関連因子であるBeclin1,LC3,HIF-1,2などを免疫染色、Western blottingで検索している。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
三次元培養、器官培養に時間を要したこと。
また、静水圧負荷装置の調整に時間を要したことから、実験の遂行がやや遅れている。
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| Strategy for Future Research Activity |
オートファジー関連因子を検索した後は、オートファジー阻害剤を投与し、発現の変化を確認する。続いて、椎間板構成細胞の基質産生能評価、細胞老化マーカー評価、アポトーシスの評価を行う。
上記を行った後、ストレス下でオートファジー誘導剤やオートファジー発現遺伝子を導入し、オートファジーが椎間板細胞におよぼす影響について検討する。
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