2015 Fiscal Year Research-status Report
変形性関節症の軟骨損傷に対する脂肪由来幹細胞を用いた予防と治療に関する基礎実験
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15K10465
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| Research Institution | Kanazawa University |
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Principal Investigator |
加畑 多文 金沢大学, 大学病院, 准教授 (10334749)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
林 克洋 金沢大学, 大学病院, 助教 (80507054)
高木 知治 金沢大学, 大学病院, 医員 (40749173)
方 向 金沢大学, 医学系, 博士研究員 (20750350)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 再生医療 / 変形性膝関節症 / 脂肪幹細胞 / paracrine effect |
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| Outline of Annual Research Achievements |
変形性膝関節症(以下OA)の軟骨変性に対し、脂肪由来間葉系幹細胞adiposed-derived stem cells (ADSC）を用いた予防・修復の可能性を動物実験で検証する。特に脂肪幹細胞のparacrine effectを増強させることによる予防・修復の効率化を確立し、臨床応用出来ないかと考えている。本研究では、ADSCシートを用いることで関節内への幹細胞の生着率を向上させ、OA予防効果の増強を目指す。平成27年度は、家兎の両膝に前十字靭帯切離術を施行し、外傷性のOAモデルを作製した。同時に家兎の後頚部から脂肪を採取し、ADSCを培養した。培養したADSCからADSCシートを作成し、OAが完成する術後4週、5週、6週の時点でADSCシートを移植した。control群にはsham手術としてADSCを含まないシートのみを移植した。術後8週・12週の時点で各群ソムノペンチルによる安楽死を行い、関節面の肉眼評価、組織学的評価、免疫組織染色、DiIによるトレーシングを行った。現在は対象数の増加と結果の解析を行っている。我々の研究チームではすでに、同モデルにおいてヒアルロン酸を担体とした研究を行っており、平成27年度に英文誌に掲載された（研究成果の雑誌論文の項を参照）。同研究は、OAモデル作製法や評価方法、移植する細胞数は本研究と共通しており、本研究結果と比較して脂肪幹細胞シートの優位性を検討していきたいと考えている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
平成27年度でOAモデルの作製、シートの移植までの手技はほぼ確立した。現在はn数を増やし、各種評価を行っている。
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| Strategy for Future Research Activity |
我々の研究チームではすでに、ヒアルロン酸を担体とした同様な研究を行っており、本研究結果と比較して脂肪幹細胞シートの優位性を検討する予定である。
平行してin vitroでの評価も検討している。具体的には、膝関節より抽出した軟骨細胞とADSCあるいはADSCシートを共培養し、OA状況下を反映するためTNF-α刺激を加える。培養液中のMMP3、MMP13、ADAMTS5をrealtime PCRで定量評価を行い、ADSCのparacrine effectを評価する。
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| Causes of Carryover |
平成27年度には研究費を適正に使用したが、OAモデルの作製およびADSCシート移植の手技の確立に予想よりも時間を要し、未使用額が生じたため平成28年度に繰り越した。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
平成28年度はOAモデルの実験を引き続き行い、さらに前述のin vitroの実験も並行して行う予定である。
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[Journal Article] The paracrine effect of adipose-derived stem cells inhibits osteoarthritis progression.2015
Author(s)
Kuroda K, Kabata T, Hayashi K, Maeda T, Kajino Y, Iwai S, Fujita K, Hasegawa K, Inoue D, Sugimoto N, Tsuchiya H.
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Journal Title
BMC Musculoskelet Disord.
Volume: 16
Pages: -
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
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