2015 Fiscal Year Research-status Report
ＧＧＣＴを標的とした低分子阻害物質による泌尿器癌治療の開発
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15K10584
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| Research Institution | Shiga University of Medical Science |
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Principal Investigator |
影山 進 滋賀医科大学, 医学部, 講師 (50378452)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
富田 圭司 滋賀医科大学, 医学部, 助教 (30640148)
花田 英紀 滋賀医科大学, 医学部, 助教 (40555067)
吉田 哲也 滋賀医科大学, 医学部, 助教 (60510310)
平竹 潤 京都大学, 化学研究所, 教授 (80199075)
吉貴 達寛 滋賀医科大学, 医学部, 客員教授 (80230704)
河内 明宏 滋賀医科大学, 医学部, 教授 (90240952)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | γ-グルタミルシクロトランスフェラーゼ / 抗癌剤 / 低分子阻害薬 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
1．GGCT阻害低分子リード化合物の設計・合成：
GGCTの反応機構にもとづき，重要な触媒残基であるGlu98を標的に，この残基と強い静電的相互作用をすると予測される環状アミジン1a（分子量314.22，構造非表示）を設計した．また，GGCTが細胞内酵素であることを考慮し，1aのプロドラッグである細胞透過性にすぐれたエステル型誘導体1d（分子量256.30，構造非表示）も設計した．現在，同化合物の合成に着手している．一方で，リコンビナントGGCTからペプチド型阻害物質をスクリーニングする検討も行った．数十種類のペプチドからN-glutaryl-L-alanine（GA）がリコンビナントGGCT活性を強く阻害することが判明した．これらをGGCT阻害薬のリード化合物候補とした．
2．同化合物のGGCT酵素活性阻害作用の検証：
リコンビナントGGCTタンパクでの酵素活性阻害が乳がん細胞MCF7（予備検討でGGCT高発現を確認済み）の内因性GGCTにおいても再現されるか検討する目的で，われわれが（株）ペプチド研究所と開発したGGCT活性蛍光基質LISA-101を用いて測定した．すると，MCF7の可溶化液に0.1mM GAを添加すると有意に蛍光が減じ，GAが細胞質由来のGGCT活性を阻害することが示された．しかしながら，細胞を破壊せずにGAを添加しても，GGCT阻害作用は認められず，GAの細胞内移行不良が示唆された．化合物1a，1dについては合成が未完成なため，GGCT酵素活性阻害の検討は出来ていない．
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
リード化合物の設計，合成およびスクリーニングが遅れたため．
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| Strategy for Future Research Activity |
進捗が遅れているものの，リード化合物の選別や作成は予定通り行っている．したがって，今後も当初計画通りの方針で，酵素活性阻害の検討，in vitroおよびin vivoにおける抗癌作用につき，検討を行っていく予定である．
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| Causes of Carryover |
研究の根幹を成すリード化合物の設計・合成・スクリーニングに遅滞が生じたため，研究費の残額が生じた．
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
研究計画自体は変更することなく進める計画であり，当初予定の研究総額を使用する予定である．
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