2017 Fiscal Year Annual Research Report
Photodynamic diagnosis of ovarian cancer by 5-aminolevulinic acid and establishment of novel treatment
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15K10713
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| Research Institution | Aichi Cancer Center Research Institute |
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Principal Investigator |
水野 美香 愛知県がんセンター(研究所), 腫瘍免疫学部, 研究員 (50588837)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
柴田 清住 藤田保健衛生大学, 医学部, 教授 (90335026)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | photodynamic therapy / 5-アミノレブリン酸 / 癌幹細胞 / 卵巣癌 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
目的；前年度、NOY細胞株において5ALA-PDTの殺細胞効果確認。NOYには癌幹細胞マーカーとして知られているCD133の発現細胞（CD133(+)細胞）の報告がある。NOY1のCD133(+)細胞はがん幹細胞様細胞であることを前提に、ALA-PDTの有効性の評価を行った。
方法；磁気ビーズ法によりCD133(+)、CD133(-)細胞が安定して分離可能と確認。in vitroでは1）各群に対して、5ALA-PDTによる殺細胞効果をWST-8 assayを用いて確認。2）光感受性物質プロトポルフィリンIX(PpIX)の細胞内外の蓄積量をprotein assayBCAタンパク質定量法で確認。3）5ALA、PpIXの取り込み・排泄に関与するトランスポーターの遺伝子発現の解析もreal time-PCRを用いて行う。in vivoでは、4）各々の細胞をヌードマウスを用いて、5ALA-PDTの効果の検証を行った。
結果；1）に関しては、両群とも5ALAの濃度依存性にPDTの有効性は示されたが、両群に有効濃度・細胞生存率に差は見られなかった。2）の実験でも、両群に蓄積量の差は無かった。3）の実験では、排泄に関わる遺伝子発現量に両群の有意差はみられなかった。ABCG2とABCB6において差を認めたが、遺伝子発現量が弱いため、有効な差ではないと考えた。5ALAの取り込み関与するPEPT1とPEPT2は、CD133(+)細胞とCD133(-)細胞の発現量に差がある可能性が高いことが示唆された。4）結果両群には差がみられなかった。
考察；今までは、卵巣がんのがん幹細胞様細胞の機能を持つ細胞は、より薬剤抵抗性が高いことが報告されていたが、今回の実験ではCD133(+)細胞へのALA-PDTの有効性があることが示された。in vivo検証では、結果が不安定であり、再考・再検証が必要と考えている
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