2015 Fiscal Year Research-status Report
変形性膝関節症の治療薬を目指した関節軟骨最表層を再生誘導する低分子化合物の探索
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15K15536
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
矢野 文子 東京大学, 医学部附属病院, 特任助教 (80529040)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
小林 寛 東京大学, 医学部附属病院, 助教 (20407951)
森崎 裕 東京大学, 医学部附属病院, 助教 (30508099)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 関節軟骨最表層 / ルブリシン / 低分子化合物 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
今年度はまず、マウス関節軟骨から関節軟骨最表層(Superficial Zone; SFZ)の細胞と、軟骨層の細胞を取り分ける手法を確立し、Prg4、1型コラーゲンのマーカーがSFZ特異的に発現し、軟骨細胞では発現が低いことを確認している。
Prg4のプロモーターに関しては、長さの異なる３つのプロモーターベクターを作成し、動作確認を行った。転写開始点に近い、最も短いタイプのものを指標に現在、GFPとの結合ベクターを作成している。候補化合物のスクリーニングは器官培養での検討を行っている。マウス大腿骨頭を単離し、化合物存在下に5日間培養を行い、上清へのアグリカンの放出量を定量し、培養後の大腿骨頭を組織学的に解析し、SFZの厚さや細胞密度などを調べ、化合物の効果を評価している。
In vivoの実験においては、関節軟骨最表層のドライバーとなるPrg4-EGFP-Creマウスを入手し、関節軟骨最表層に発現している、遺伝子floxマウスと交配を開始した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
順調にIn vitroの解析に必要なツール作成、発現マーカーの確認、プライマリー細胞の採取と培養ができている。In vivo解析に必要なマウスの入手もでき、交配も進んでいる。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後は、関節軟骨最表層再生、破壊防止をするような化合物を絞り込み、その機能解析を行う予定である。さらに、Prg4-EGFP-Creマウスと関節軟骨最表層に必須の遺伝子のfloxマウスとの交配で、変形性膝関節症（ＯＡ）モデルを作成し、関節軟骨最表層を制御する分子の同定を行う。
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| Causes of Carryover |
おおむね研究が順調に進み、当初想定していた研究費用を下回る予算で実行できたため。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
In vitroの解析に必要なツール作成、発現マーカーの確認、プライマリー細胞の採取と培養にかかる試薬、器具、マウスの購入。
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Research Products
(16 results)
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[Journal Article] Comparison of mouse and human ankles and establishment of mouse ankle osteoarthritis models by surgically-induced instability.2016
Author(s)
Chang SH, Yasui T, Taketomi S, Matsumoto T, Kim-Kaneyama JR, Omiya T, Hosaka Y, Inui H, Omata Y, Yamagami R, Mori D, Yano F, Chung U, Tanaka S, Saito T.
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Journal Title
Osteoarthritis Cartilage
Volume: 24
Pages: 688-697
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Prevalence of hand osteoarthritis and its relationship to hand pain and grip strength in Japan: The third survey of the ROAD study.2016
Author(s)
Kodama R, Muraki S, Oka H, Iidaka T, Teraguchi M, Kagotani R, Asai Y, Yoshida M, Morizaki Y, Tanaka S, Kawaguchi H, Nakamura K, Akune T, Yoshimura N
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Journal Title
Mod Rheumatol.
Volume: 16
Pages: 1-7
Peer Reviewed
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[Journal Article] Hyaline cartilage formation and tumorigenesis of implanted tissues derived from human induced pluripotent stem cells.2015
Author(s)
Saito T, Yano F, Mori D, Kawata M, Hoshi K, Takato T, Masaki H, Otsu M, Eto K, Nakauchi H, Chung UI, Tanaka S.
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Journal Title
Biomed Res.
Volume: 36
Pages: 179-186
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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