2016 Fiscal Year Research-status Report
変形性膝関節症の治療薬を目指した関節軟骨最表層を再生誘導する低分子化合物の探索
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15K15536
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
矢野 文子 東京大学, 医学部附属病院, 特任助教 (80529040)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
小林 寛 東京大学, 医学部附属病院, 助教 (20407951)
森崎 裕 東京大学, 医学部附属病院, 助教 (30508099)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 関節軟骨最表層 / ルブリシン |
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| Outline of Annual Research Achievements |
Prg4のプロモーターとエンハンサーをタンデムにつなげたレポータージーンを持つベクターを共同研究先より今年度、入手できたことから、Prg4を誘導する化合物のスクリーニングをより特異的に検出できることができるようになる。
今年度はマウス関節軟骨より関節軟骨最表層（Superficial Zone; SFZ)の細胞と、軟骨層の細胞を取り分ける手法を昨年度、確立したので、SFZ細胞を用いて、骨・軟骨代謝が関連する各シグナルの修飾化合物を投与することで、Prg4プロモーターを上昇させるような分子をレポーターアッセイで検索している。いまのところ、Hif2a、Wntシグナルが有望であることがわかり、これらのアゴニストを添加して関節軟骨最表層の変化をIn vitroまたはEx vivoで検証している。
昨年度マウスの掛け合わせを開始した、Prg4特異的Hif2aシグナルの強制発現型、機能抑制型マウス、またはPrg4特異的Wntシグナル強制発現型、機能抑制型マウスのOAモデルにおけるPrg4とHif2aまたはWntシグナルの役割を明らかにするために行っている。
さらにこれらのマウス5日齢の関節よりSFZ細胞を単離し、Hif2a、Wntシグナルとの関連を明らかにするために、ｃDNAマイクロアレイを行い、遺伝子発現プロファイルを取得し、現在解析を行っている。
なお、Prg4の発現をDTA(Diphtheria toxin)でPrg4発現細胞自体を殺すマウスを作成しており、骨格成長段階でのPrg4の様々な運動器における発現解析と、さらにin vitroでは機能解析の解析を開始している。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
順調にIn vitroでの解析の結果も得られ、マウスの解析も進んでいる。さらにアメリカとの共同研究が開始したことから、遺伝子発現ベクターやマウスを得られることから今後の研究が加速することが予想される。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後は関節軟骨最表層を保護する化合物を同定し、変形性膝関節症モデルマウスを用いた治療効果の検討を行う。
さらに、化合物が修飾するシグナルのターゲットfloxマウスとPrg4-EGFP-Creマウスと掛け合わせることで、機能喪失実験で再確認する予定である。
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| Causes of Carryover |
トランスジェニックマウスの作成は共同研究先が受け持ったことで、解析の費用のみが必要とされた。さらに次年度マウスを用いた実験が多くなることが予想されたため
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
抗体の購入、マウスモデルの大量解析を予定している。
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[Journal Article] p63 Regulates Chondrocyte Survival in Articular Cartilage2017
Author(s)
Taniguchi Y, Kawata M, Ho Chang S, Mori D, Okada K, Kobayashi H, Sugita S, Hosaka Y, Inui H, Taketomi S, Yano F, Ikeda T, Akiyama H, Mills AA, Chung UI, Tanaka S, Kawaguchi H, Saito T
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Journal Title
Arthritis Rheumatol
Volume: 69
Pages: 598-609
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Impact of geriatric factors on surgical and prognostic outcomes in elderly patients with soft-tissue sarcoma.2017
Author(s)
Tsuda Y, Ogura K, Kobayashi E, Hiruma T, Iwata S, Asano N, Kawai A, Chuman H, Ishii T, Morioka H, Kobayashi H, Kawano H.
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Journal Title
Jpn J Clin Oncol.
Volume: 15
Pages: 1-8
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Biphasic regulation of chondrocytes by Rela through induction of anti-apoptotic and catabolic target genes2016
Author(s)
Kobayashi H, Chang SH, Mori D, Itoh S, Hirata M, Hosaka Y, Taniguchi Y, Okada K, Mori Y, Yano F, Chung UI, Akiyama H, Kawaguchi H, Tanaka S, Saito T
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Journal Title
Nat Commun
Volume: 10
Pages: 13336
DOI
Open Access
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[Journal Article] Comparison of mouse and human ankles and establishment of mouse ankle osteoarthritis models by surgically-induced instability2016
Author(s)
Chang SH, Yasui T, Taketomi S, Matsumoto T, Kim-Kaneyama JR, Omiya T, Hosaka Y, Inui H, Omata Y, Yamagami R, Mori D, Yano F, Chung UI, Tanaka S, Saito T
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Journal Title
Osteoarthritis Cartilage
Volume: 24
Pages: 688-697
DOI
Peer Reviewed
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