転移先臓器を標的とした骨軟部腫瘍の新規治療法の開発

2015 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 15K15560
• Research Institution: Research Institute, Osaka Medical Center for Cancer and Cardiovascular Disaeses
• Principal Investigator: 伊藤 和幸 地方独立行政法人大阪府立病院機構大阪府立成人病センター(研究所), その他部局等, 総括研究員(生物学部門長) (20301806)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2017-03-31
• Keywords: metastasis / lung / CTC / Osteosarcoma / VEGF

Outline of Annual Research Achievements

研究の概要：骨肉腫(OS)を始めとする骨軟部腫瘍患者の予後は、肺転移により最も大きく左右される。最近、転移成立過程における転移巣での生着、増殖の役割が大きくクローズアップされている。我々は、H25-26年度の挑戦的萌芽研究（課題番号25670661）を行う過程で、我々の研究室で樹立したマウス骨肉腫高肺転移株（LM8）を同種同所移植後、循環腫瘍細胞（CTC）を生きたままで培養することに世界で初めて成功、CTCを原発巣のLM8と比較しCTCの方が高いanti-anoikis活性を有し浮遊培養条件下でも増殖することを報告した。さらに肺という原発巣と異なる環境下における腫瘍細胞の増殖にstiffnessの異なる条件下での3次元増殖にVEGFが重要な役割をする事を見いだした。本研究目的は、転移先を標的とした新規抗転移治療の臨床応用への道筋を開くことである。
研究の方法：骨軟部腫瘍症例（原発巣、転移巣）から我々が樹立した細胞株を用いて、in vitroの3次元培養系を用いて、種々の分子標的治療薬の増殖、形態、運動能に与える影響を検討、細胞内シグナルを生化学的に検討、また免疫不全マウスを用いた動物実験を行い薬効評価する。我々が以前樹立したマウス骨肉腫細胞株（LM８）を用いて、新規薬物（生薬等を含む）の転移に対する効果を、in vitro, 同種マウスを用いた動物実験で検討す。、
今年度の実績：主として、共同研究先である大阪大学医学部整形外科との研究で新規分子標的治療薬（Trabectedin)の滑膜肉腫細胞に対する効果を、京都府立大学との研究でLM8を用いた実験を行い、漢方薬（Daphnectin)の骨肉腫肺転移に対する効果を、また九州大学と北里大学薬学部との共同研究でLM8を用いた実験を行い、漢方薬（麻黄)の骨肉腫肺転移に対する効果を検討し各々論文発表を行っている。下記研究発表の項参照。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

1. 研究機関を異動することになり、成人病センター研究所から、野崎徳州会病院に新設される研究所へ異動することになり、その設計、準備等に多くの時間が費やされ、思ったほどに動物実験を含む実験が出来なかった。その代わりに、大阪大学医学部整形外科の大学院生と共同研究を行い、患者樹立骨軟部腫瘍細胞を用いた実験は、大阪大学医学部の方で主として行ない、毎月１回水曜の夜に合同の研究 meetingを行い、実験結果のdiscussion, 論文執筆の指導等を行った。成果は国際誌に論文発表した。
2. 2015年7月22-24日にに全国規模のがん転移の学会（日本がん転移学会）を、大阪（City Plaza Hotel)で開催した。海外より2名、日本全国より250名ほどのがん転移の研究者が集まり、多くの研究成果を交換し合えた。大学ではない研究施設で主催したため、学会の準備、運営等に多くの時間を割かれたが、獲得できたものは、非常に多かった。
3. 2016年7月に開設予定の、野崎徳州会病院（研究所）～現在科学研究費補助金認定施設へ登録申請中に、小動物（ラット、マウス）用のCTを（患者さんからの寄付により）導入出来るので、稼働できしだい、LM8の肺転移巣における微小変化（線維化）をreal timeに経時的に捕らえることが出来ると考えられ、研究の進展が大いに期待される。そのため、研究費を次年度にかなり持ち越した。

Strategy for Future Research Activity

2016年7月に開設予定の、野崎徳州会病院（研究所）～ごく最近科学研究費補助金施設に認定～に、小動物（ラット、マウス）用のCT( Hitachi製作所社製　Latheta LCT-200)、を（患者さんからの寄付により）導入出来るので、稼働できしだい、LM8の肺転移巣における微小変化（線維化）をreal timeに経時的に捕らえることが出来ると考えられ、研究の進展が大いに期待される。新研究所はクレア社に依頼して十分な設備の整った動物実験施設を含む6F建ての建物が2016年7月完成予定で、現在の研究メンバーに加え、私共のlab出身で米国に留学していた小児科の由井Drや阪大整形外科出身のDrsもの研究所に参入してくれる事が決まっており、画像による詳細な検討と共に、分子生物学的、生化学的な解析が十分出来ると期待される。そのため、研究費を次年度にかなり持ち越した
又、共同研究先である大阪大学、京都薬科大学、九州大学、北里大学の研究者とは、前述した日本がん転移学会で知り合った仲間で、転移に対する新規治療法の開発という共通のテーマで真摯に共同研究を行っており、将来の研究の進展が期待される。研究成果は、日本がん転移学会や日本癌学会で発表すると共に、隔年開催される国際転移学会（2016年9月、中国成都）で口頭発表する予定である。

Causes of Carryover

研究部門の異動に伴い、、

Expenditure Plan for Carryover Budget

2016年7月に開設予定の、野崎徳州会病院（研究所）～ごく最近科学研究費補助金施設に認定～に、小動物（ラット、マウス）用のCT( Hitachi製作所社製　Latheta LCT-200)、を（患者さんからの寄付により）導入出来るので、稼働できしだい、LM8の肺転移巣における微小変化（線維化）をreal timeに経時的に捕らえることが出来ると考えられ、研究の進展が大いに期待される。新研究所はクレア社に依頼して十分な設備の整った動物実験施設を含む6F建ての建物が2016年7月完成予定で、現在の研究メンバーに加え、私共のlab出身で米国に留学していた小児科の由井Drや阪大整形外科出身のDrsもの研究所に参入してくれる事が決まっており、画像による詳細な検討と共に、分子生物学的、生化学的な解析が十分出来ると期待される。そのため、研究費を次年度にかなり持ち越した。

Research Products

• [Journal Article] Trabectedin is a promising antitumour agent for synovial sarcoma (2016)
  • Author(s): Yasui, H., Imura, Y., Outani, H., Hamada, K., Nakai, T., Yamada, S., Takenaka, S., Sasagawa, S., Araki, N., Itoh, K., Myoui, A., Yoshikawa, H., & Naka, N.
  • Journal Title: Journal of Chemotherapy Volume: e-pub ahead of print Pages: 1-8
  • DOI: 10.1080/1120009X.2015.1133013
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Daphnetin inhibits invasion and migration of LM8 murine osteosarcoma cells by decreasing RhoA and Cdc42 expression (2016)
  • Author(s): Fukuda, H., Nakamura, S., Chisaki, Y., Takada, T., Toda, Y., Murata, H., Itoh, K., Yano, Y., Takata, K., and Ashihara, E.
  • Journal Title: BBRC Volume: 471(1) Pages: 63-37
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2016.01.179
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Ephedrae herba stimulates hepatocyte growth factor-induced MET endocytosis and downregulation via early/late endocytic pathways in gefitinib-resistant human lung cancer cells (2016)
  • Author(s): Nishimura, Y., Hyuga, S., Takiguchi, S., Hyuga, M., Itoh, K., Hanawa, T.
  • Journal Title: International Journal of Oncology Volume: 48(5) Pages: 1895-1906
  • DOI: 10.3892/ijo.2016.3426
  • Peer Reviewed
• [Presentation] 滑膜肉腫細胞株におけるTAS-115の抗腫瘍効果：TAS-115はMET signalのみならずPDGFRα signalも抑制する (2015)
  • Author(s): 山田修太郎、伊村慶紀、中井隆彰、金子恵子、荒木信人、伊藤和幸、吉川秀樹、中紀文
  • Organizer: 第74回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: 名古屋国際会議場（愛知県名古屋市）
  • Year and Date: 2015-10-08 – 2015-10-10
• [Presentation] 滑膜肉腫に対する選択的c-MET阻害剤(INC280)の感受性を予知するバイオマーカーの探索 (2015)
  • Author(s): 伊村慶紀、中井隆彰、山田修太郎、王谷英達、濱田健一郎、金子恵子、名井陽、荒木信人、伊藤和幸、吉川秀樹、中紀文
  • Organizer: 第74回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: 名古屋国際会議場（愛知県名古屋市）
  • Year and Date: 2015-10-08 – 2015-10-10
• [Presentation] 新規マウス軟部肉腫高肺転移株樹立の試み (2015)
  • Author(s): 金子恵子、中紀文、伊村慶紀、中井隆彰、山田修太郎、濱田健一郎、王谷英達、伊藤和幸、吉川秀樹
  • Organizer: 第74回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: 名古屋国際会議場（愛知県名古屋市）
  • Year and Date: 2015-10-08 – 2015-10-10
• [Presentation] 淡明細胞肉腫に対するtrabectedin(Yondelis; ET-743)の抗腫瘍効果 (2015)
  • Author(s): 中井隆彰、伊村慶紀、山田修太郎、金子恵子、王谷英達、濱田健一郎、名井陽、荒木信人、伊藤和幸、吉川秀樹、中紀文
  • Organizer: 第74回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: 名古屋国際会議場（愛知県名古屋市）
  • Year and Date: 2015-10-08 – 2015-10-10
• [Presentation] 日本がん転移学会と共に (2015)
  • Author(s): 伊藤和幸
  • Organizer: 第24回日本がん転移学会学術集会・総会
  • Place of Presentation: シティプラザ大阪（大阪府大阪市）
  • Year and Date: 2015-07-23 – 2015-07-24
• [Presentation] 滑膜肉腫におけるMETシグナルの役割とMET阻害剤に対する感受性を予知するバイオマーカーの探索 (2015)
  • Author(s): 伊村慶紀、王谷英達、中井隆彰、山田修太郎、濱田健一郎、名井陽、荒木信人、上田孝文、伊藤和幸、吉川秀樹、中紀文
  • Organizer: 第48回日本整形外科学会 骨・軟部腫瘍学術集会
  • Place of Presentation: かがわ国際会議場（香川県高松市）
  • Year and Date: 2015-07-09 – 2015-07-10
• [Presentation] 淡明細胞肉腫に対するtrabectedin (Yondelis; ET-743)の有効性 (2015)
  • Author(s): 中井隆彰、伊村慶紀、山田修太郎、金子恵子、王谷英達、濱田健一郎、名井陽、荒木信人、上田孝文、伊藤和幸、吉川秀樹、中紀文
  • Organizer: 第48回日本整形外科学会 骨・軟部腫瘍学術集会
  • Place of Presentation: かがわ国際会議場（香川県高松市）
  • Year and Date: 2015-07-09 – 2015-07-10
• [Presentation] 滑膜肉腫細胞株に対するTAS-115の抗腫瘍効果の検討 (2015)
  • Author(s): 山田修太郎、伊村慶紀、中井隆彰、王谷英達、濱田健一郎、名井陽、荒木信人、上田孝文、伊藤和幸、吉川秀樹、中紀文
  • Organizer: 第48回日本整形外科学会 骨・軟部腫瘍学術集会
  • Place of Presentation: かがわ国際会議場（香川県高松市）
  • Year and Date: 2015-07-09 – 2015-07-10
• [Book] Osteosarcoma A Multidisciplinary Approach to Treatment (2016)
  • Author(s): Toguchida T, Itoh K, Tsukahara T, Ogura K, Nishida Y, Kaya M, Hiraga H, Kakunaga S, Matsumine A, Futani H, Kunisada T, Morii T, Araki N, Ae K, Tsuchiya H, Matsubara H, Matsumoto S, Imai R, Iwata S, Yonemoto T. 他
  • Total Pages: 270 (19-29)
  • Publisher: Springer