“Exosome Cargo”： DAMPs の新規デリバリーシステムの提唱

2015 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 15K15667
• Research Institution: Kagoshima University
• Principal Investigator: 丸山 征郎 鹿児島大学, 医歯学総合研究科, 特任教授 (20082282)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 山口 宗一 鹿児島大学, 医歯学域医学系, 准教授 (20325814) ; 伊藤 隆史 鹿児島大学, 医歯学総合研究科, 講師 (20381171)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2016-03-31
• Keywords: エクソソーム / HMGB1 / Histones / microRNA / 糖鎖構造 / Heat shock protein / Alix / メラノーマ細胞株A375

Outline of Annual Research Achievements

１．エクソソーム内にはヒストンが内包されているが、HMGB1 の内包に関しては証明できていない。　１）エクソソームの分離法：メラノーマ細胞A375 の培養液から超遠心（５００ｘｇと１９０００ｘｇ）で分離した上清を、さらに１００，０００ｇで超遠心して得られた pellet 分画にエクソソームが回収されることを、電顕、抗Alix抗体免疫電顕法にて確認したので、この分画を用いて以下の実験に供した。２）本分画をimmunoblot 法で解析すると、ＣＤ９テトラスパンニン、Alix（小胞体関連蛋白）、CD63, heat shock protein 70 などは陽性であった。Histones も陽性であったが、現時点ではHMGB1 の存在は確認しえていない。現在さらに研究中である。　３）またエクソソーム内に内包されているHistone の種類とエピジェネティック修飾（シツルリン化など）の解析も進行中である。
２．エクソソーム表面糖鎖構造：糖鎖構造に関しては特徴的なものを発見して、現在その構造決定が進行中である（原田雄一郎准教授ら、山本美佳ら）
３．microRNA の解析：上述の方法で回収したエクソソーム内包microRNA の解析では、エクソソームに特徴的なものは現時点では同定しえていないが、現在進行中である。
４．今後さらにHMGB1含有の検索を推進し、その存在を検証、HMGB1 分子のフェノタイプ、すなわち還元型、部分酸化型、全酸化型を決定予定である。

Research Products

• [Journal Article] Potential diagnostic markers for disseminated intravascular coagulation of sepsis. (2016)
  • Author(s): Iba T, Ito T, Maruyama I, Jilma B, Brenner T, Müller MC, Juffermans NP, Thachil J.
  • Journal Title: Blood Rev. Volume: 30（2） Pages: 149-55
  • DOI: 10.1016/j.blre.2015.10.002.
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] The E3 ligase synoviolin controls body weight and mitochondrial biogenesis through negative regulation of PGC-1β. (2015)
  • Author(s): Fujita H, Yagishita N, Aratani S, Saito-Fujita T, Morota S, Yamano Y, Hansson MJ, Inazu M, Kokuba H, Sudo K, Sato E, Kawahara K, Nakajima F, Hasegawa D, Higuchi I, Sato T, Araya N, Usui C, Nishioka K, Nakatani Y, Maruyama I, Usui M, Hara N, Uchino H, Elmer E, Nishioka K, Nakajima T.
  • Journal Title: EMBO J. Volume: 34（8） Pages: 1042-55
  • DOI: 10.15252/embj.201489897.
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Gene transfer of high-mobility group box 1 box-A domain in a rat acute liver failure model. (2015)
  • Author(s): Tanaka M, Shinoda M, Takayanagi A, Oshima G, Nishiyama R, Fukuda K, Yagi H, Hayashida T, Masugi Y, Suda K, Yamada S, Miyasho T, Hibi T, Abe Y, Kitago M, Obara H, Itano O, Takeuchi H, Sakamoto M, Tanabe M, Maruyama I, Kitagawa Y.
  • Journal Title: J Surg Res. Volume: 194（2） Pages: 571-80
  • DOI: 10.1016/j.jss.2014.11.022.
  • Peer Reviewed / Open Access