2016 Fiscal Year Annual Research Report
We investigate the essence of osseointegration and biointegration in the cell
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15K15741
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| Research Institution | The University of Tokushima |
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Principal Investigator |
宮本 洋二 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(歯学系), 教授 (20200214)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
玉谷 哲也 徳島大学, 病院, 講師 (30274236)
高丸 菜都美 徳島大学, 病院, 助教 (40513031)
永井 宏和 東北大学, 歯学研究科, 准教授 (50282190)
大江 剛 徳島大学, 病院, 助教 (60432762)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | スパッタ法 / マイクロアレイ解析 / マウス骨芽細胞様細胞 / ヒト骨髄間葉系幹細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
スパッタ法を用いることによって，ガラスディッシュ表面にチタン，金およびステンレスをコーティングして，表面粗さや表面形状が同一で材質だけがことなる試料を作成した。
これらディッシュ（チタン，金，ステンレス，ガラス）上で，ヒト骨髄間葉系幹細胞（hMSC-BM: Promo Cell No C-12974）を6時間培養し，RNAを抽出後， Gene Chip Human Gene 2.0 ST ArrayおよびGene Chip miRNA 4.0 Array（Affymetrix社製）を用いて，遺伝子およびmiRNA発現を比較検討した。ガラス，金，ステンレス上で培養した3群に比較してチタン上で培養すると，2倍以上の発現上昇を示した2遺伝子と5 miRNA，2分の1以下に発現低下した2 遺伝子と2 miRNAを同定した。
さらに，これらディッシュ（チタン，金，ステンレス，ガラス）上で，マウス骨芽細胞様細胞（MC3T3-E1細胞）を6時間培養し，RNAを抽出後，SurePrint G3 Mouse 8x60k 2.0（Agilent technologies社製）および3D Gene Mouse miRNA Oligo chip（東レ株式会社製）を用いて，遺伝子およびmiRNAの発現を比較検討した。候補となったmiRNAについては，real time PCRにて定量した。ガラス，金，ステンレス上で培養した3群に比較してチタン上で培養すると，20倍以上の発現上昇を示した20遺伝子と1.5倍以上発現が上昇した2 miRNA，0.3倍以下の発現低下を示した8遺伝子と0.7倍以下の発現低下を示した14 miRNAを同定した。
その候補となった遺伝子およびmiRNAは，オッセオインテグレーション獲得に関与している可能性が示唆された。
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