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2015 Fiscal Year Research-status Report

TRPA1受容体の食事性リガンド受容機構の解析

Research Project

Project/Area Number 15K16212
Research InstitutionOkayama University

Principal Investigator

中村 俊之  岡山大学, その他の研究科, 助教 (90706988)

Project Period (FY) 2015-04-01 – 2017-03-31
Keywordsフラボノイド / イソチオシアネート / TRPA1
Outline of Annual Research Achievements

本研究では、TRPA1(Transient Receptor Potential Ankyrin 1)受容体と食品成分の相互作用を免疫化学・分析化学的に明らかにすることで、受容体の機能性発現機構を分子レベルで解明することを目的としている。TRP受容体は、活性化するとエネルギー代謝亢進、不活性化すると鎮痛効果が期待される機能性イオンチャネルである。TRPA1受容体による食品成分受容機構の理解は、受容体を制御する上で重要な知見になると考えられる。
本年度は、(1)ヒト TRPA1 受容体を発現させたHEK293T細胞を用いたカルシウムイメージングによりTRPA1受容体を活性化するフラボノイド類を確認した。その結果、ケンフェロールやミリセチンなど数種類の新規TRPA1受容体アゴニストを見出した。また、代表的なフラボノイドであるケルセチンの配糖体および代謝物、ダイゼインの代謝物を用いてTRPA1受容体との相互作用を確認したところ、メチル化されたケルセチンおよびダイゼイン代謝物であるエクオールがTRPA1受容体を活性化することが明らかとなった。(2)抗フラボノイド抗体を作製するため、ジヒドロキシフェニル酢酸とタンパク質をカルボジイミド法を用いて結合させ抗原を作製した。得られた抗原をBalb/cマウスの腹腔内に免疫後、細胞融合によりハイブリドーマを作製し、スクリーニングすることで新規モノクローナル抗体を得ることができた。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

当初の計画通り、フラボノイド類に対する抗体の作製を試み、新規モノクローナル抗体の作製に成功している。

Strategy for Future Research Activity

得られた抗体の特異性を解析するとともに、リガンド受容機構の解析を行う。

  • Research Products

    (3 results)

All 2016 2015

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results,  Acknowledgement Compliant: 1 results) Presentation (2 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results)

  • [Journal Article] Activation of transient receptor potential ankyrin 1 by quercetin and its analogs.2016

    • Author(s)
      Toshiyuki Nakamura, Noriyuki Miyoshi, Takeshi Ishii, Miyu Nishikawa, Shinichi Ikushiro, Tatsuo Watanabe
    • Journal Title

      Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry

      Volume: 80 Pages: 949-954

    • DOI

      10.1080/09168451.2015.1132148

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Presentation] Quercetin and its analogues activates TRPA1.2015

    • Author(s)
      Toshiyuki Nakamura, Noriyuki Miyoshi, Takeshi Ishii, Miyu Nishikawa, Shinichi Ikushiro, Tatsuo Watanabe
    • Organizer
      International Conference on Food Factors
    • Place of Presentation
      Soul, Korea
    • Year and Date
      2015-11-22 – 2015-11-25
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Modulation of TRPA1 activity by flavonoids2015

    • Author(s)
      Toshiyuki Nakamura, Noriyuki Miyoshi, Takeshi Ishii, Shinichi Ikushiro, Tatsuo Watanabe
    • Organizer
      International Symposium on Dietary Antioxidants and Oxidative Stress in Health 2015
    • Place of Presentation
      Awaji, Japan
    • Year and Date
      2015-08-30 – 2015-08-31
    • Int'l Joint Research

URL: 

Published: 2017-01-06  

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