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2016 Fiscal Year Research-status Report

栄養繁殖個体間において形質の不均一性を引き起こすエピジェネティクス

Research Project

Project/Area Number 15K18638
Research InstitutionKyoto University

Principal Investigator

大野 翔  京都大学, 農学研究科, 助教 (10722001)

Project Period (FY) 2015-04-01 – 2018-03-31
Keywordsダリア / 花色 / フラボノイド / カルコンシンターゼ / 転写後遺伝子サイレンシング / 不安定性 / 栄養繁殖 / siRNA
Outline of Annual Research Achievements

複色花ダリアを栽培すると品種本来の複色花弁の他に単色花弁をつけることがある。ダリアは栄養繁殖によって増殖されることから、この不安定な花色発現は遺伝的な要因が原因ではない。本研究は、赤白複色ダリアである‘結納’をモデル植物としてこの現象を解明することで、栄養繁殖後代の個体間において見られる形質の不均一性を引き起こすエピジェネティックな変異メカニズムを解明するものである。
これまでの研究より、‘結納’の 形質の不均一性には、カルコン合成酵素遺伝子(DvCHS1およびDvCHS2)の転写後遺伝子サイレンシング(PTGS)が重要であることが示唆されている。PTGSを誘導する遺伝子構造として、ゲノムにおける遺伝子のタンデムあるいは逆位リピート構造が知られている。そこで、複色花品種と単色花品種についてDvCHS1およびDvCHS2のゲノム量をqPCRにより解析すると、複色花品種でDvCHS2のコード領域および3´近傍領域でゲノム量が単色花品種の2倍以上あることが示唆された。また、DvCHS2をプローブに用いてDNAゲルブロット分析を行うと、複色花品種特異的に濃いバンドが検出された。このアレルを単離し、3´近傍領域約3kbまで解析しても反復配列は見当たらなかった。以上より、DvCHS2のPTGSを生じる原因遺伝子は単純な反復配列ではなく、DvCHS2の比較的長い配列の重複であると考えられた。
さらに、NMR解析により‘結納’の葉のフラボノイドの同定を行った。フラボノイドを蓄積する葉からは30以上のピークが検出され、そのうち6種の有機酸、4種のフラボノール、3種の新規ブテイン化合物を同定できた。フラボノイドを蓄積しない葉からは有機酸のみが検出され、フラボノールおよびブテインの合成に共通して関与する形質の不均一性におけるCHSの重要性が確認された。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

RNA-seq・small RNAのマッピング解析・ゲノム解析・葉のフラボノイドの同定などのデータはすべてDvCHS2がCHSのPTGSを引き起こす原因遺伝子であり、かつ形質の不均一性の原因となる遺伝子であることを示唆するものであった。したがって、形質の不均一性のメカニズムに関しての理解が進んだことから、本研究課題はおおむね順調に進展しているとした。

Strategy for Future Research Activity

前々年度に‘結納’において花弁色とシュートにおけるフラボノイドの有無に相関が見られたので、‘結納’と同様に形質の不均一性を示す他の複色花品種に関しても、開花した花序の花弁色と花序直下葉のフラボノイド蓄積の関連を調査し、同様の現象を生じているかの調査を継続する。
PTGSを誘導する遺伝子構造として、ゲノムにおける遺伝子のタンデムあるいは逆位リピート構造が知られているが、これまでの研究成果から‘結納’では単純な反復配列ではなく、ゲノム全体の重複配列である可能性も考えられた。もしそうであれば原因遺伝子の配列の決定が容易ではないため、DNAメチル化感受性制限酵素を用いたDNAゲルブロットにより、大まかにDNAのエピジェネティックな変化を捉える予定である。
また、苗選抜により花弁色の不均一性を解消できるかどうかについても検証する。

Causes of Carryover

これまでの実験により、ある程度形質の不均一性に関わる原因遺伝子を推定できたため、次世代シークエンスによる網羅的な解析などを見送ったため、その分に余剰が出ている。

Expenditure Plan for Carryover Budget

平成29年度に追加で次世代シークエンス解析を行う予定である。

  • Research Products

    (7 results)

All 2017 2016 Other

All Presentation (6 results) (of which Int'l Joint Research: 4 results,  Invited: 2 results) Remarks (1 results)

  • [Presentation] ダリア‘祝盃’から発生した枝変わり品種群の花色変異2017

    • Author(s)
      山田晴香・加藤泰成・出口亜由美・細川宗孝・立澤文見・土井元章・大野翔
    • Organizer
      園芸学会平成29年度春季大会
    • Place of Presentation
      日本大学(神奈川県・藤沢市)
    • Year and Date
      2017-03-19 – 2017-03-20
  • [Presentation] Different flower color changes induced by the infection with tobacco streak virus (strain dahlia) among bicolor dahlia cultivars2016

    • Author(s)
      Deguchi A, Hosokawa M, Tatsuzawa F, Doi M, Ohno S
    • Organizer
      Latest Advances in Plant Development & Environmental Response, Cold Spring Harbor Conferences Asia (CSHA2016)
    • Place of Presentation
      淡路市(日本)
    • Year and Date
      2016-11-29 – 2016-12-02
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Post-transcriptional gene silencing of chalcone synthase plays an important role in petal color lability of bicolor flowering dahlia2016

    • Author(s)
      Ohno S, Hori W, Hosokawa M, Tatsuzawa F, Doi M
    • Organizer
      Latest Advances in Plant Development & Environmental Response, Cold Spring Harbor Conferences Asia (CSHA2016)
    • Place of Presentation
      淡路市(日本)
    • Year and Date
      2016-11-29 – 2016-12-02
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] ost-transcriptional gene silencing of chalcone synthase is associated with petal color lability in a bicolor flowering dahlia.2016

    • Author(s)
      Ohno S, Hori W, Hosokawa M, Tatsuzawa F, Doi M
    • Organizer
      2nd Asian Horticultural Congress (AHC2016)
    • Place of Presentation
      成都(中国)
    • Year and Date
      2016-09-26 – 2016-09-28
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] 複色花ダリアの複色模様形成を引き起こす候補遺伝子2016

    • Author(s)
      大野翔・保里和香子・細川宗孝・立澤文見・土井元章
    • Organizer
      園芸学会平成28年度秋季大会
    • Place of Presentation
      名古屋大学(愛知県・名古屋市)
    • Year and Date
      2016-09-10 – 2016-09-12
  • [Presentation] The mystery of black dahlia: Chemical, biochemical and biological aspects2016

    • Author(s)
      Ohno S
    • Organizer
      28th International Conference on Polyphenols (ICP2016)
    • Place of Presentation
      ウィーン(オーストリア)
    • Year and Date
      2016-07-11 – 2016-07-15
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Remarks] 京都大学大学院農学研究科蔬菜花卉園芸学研究室

    • URL

      http://www.hort.kais.kyoto-u.ac.jp/

URL: 

Published: 2018-01-16  

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