2015 Fiscal Year Research-status Report
マラリア免疫記憶の成立・維持の分子基盤を自然免疫リンパ球から紐解く
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15K19085
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| Research Institution | Kyorin University |
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Principal Investigator |
井上 信一 杏林大学, 医学部, 助教 (20466030)
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2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | マラリア / γδ T細胞 / 免疫記憶 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
免疫記憶は生体による病原体感染防御にとって必須の現象であるものの、マラリアに対する免疫記憶の形成・維持機構はほとんど分かっていない。したがって、如何にしてマラリア免疫記憶機構が働いているのかを解明することは、マラリア研究において極めて重要な課題である。本研究は、γδ T細胞の機能解析を基軸としてマラリア免疫記憶機構の分子基盤を解明することを目的としている。
まず、弱毒株と強毒株のマウスマラリア原虫感染を組み合わせた免疫記憶実験系において、抗体によるγδ T細胞除去をおこない、免疫記憶の形成・維持にγδ T細胞が重要であるのか検証した。弱毒株の感染後90～120日目に抗体によりγδ T細胞除去をして、さらにその60日後に強毒株のチャレンジ感染をすると、コントロールと比較してパラシテミアの増加割合が高くなった。この結果は、免疫記憶細胞の維持にγδ T細胞が重要な働きを担っている可能性を示唆するものである。
さらに、γδ T細胞が免疫記憶の成立・維持に及ぼす効果に関与する分子の特定するために、非感染マウスと弱毒株マラリア原虫の感染耐過マウス由来のγδ T細胞をフローサイトメトリーで単離し、マイクロアレイにより網羅的な遺伝子発現解析をおこなった。また、各分化段階のB細胞と抗体産生細胞に対するγδ T細胞の影響の解明するため、弱毒株マラリア原虫の感染前後の脾臓のナイーブB細胞、活性化B細胞やマラリア原虫特異的な抗体産生細胞の細胞数について、フローサイトメーターやELISPOTを用いて解析した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
本研究は、γδ T細胞の機能解析を基軸としてマラリア免疫記憶機構の分子基盤を解明することを目的としている。
研究計画書の予定通り、本年度は、下記三項目(A-C)についての実験を進めた。
(A) 記憶細胞の分化・維持におけるγδ T細胞の重要性の解明: 弱毒株マウスマラリア原虫の感染耐過マウスに強毒株マラリア原虫を感染させる免疫記憶実験系に、抗体によるγδ T細胞除去を組み合わせて免疫記憶の形成・維持にγδ T細胞が重要であるのか検証した。その結果、弱毒株感染をした後に原虫排除がなされたマウスに対してγδ T細胞除去をすると、その後の強毒株感染に対する免疫防御能が低下することがわかったことから、免疫記憶細胞の維持にγδ T細胞が重要な働きを担っている可能性を示すことが出来た。
(B) γδ T細胞が免疫記憶の成立・維持に及ぼす効果に関与する分子の特定: 非感染マウスと弱毒株マラリア原虫感染より治癒したマウス由来のγδ T細胞をフローサイトメトリーで単離し、マイクロアレイにより網羅的な遺伝子発現解析をおこなった。その結果、治癒後のマウスから取ったγδ T細胞において優位に発現する遺伝子を候補分子として挙げることが出来た。(注：当初の予定では遺伝子解析は業者に受託解析を依頼する予定であったが、実際には当学内でおこなった。結果としては、特に問題なく解析をおこなえた。)
(C) 各分化段階のB細胞と抗体産生細胞に対するγδ T細胞の影響の解明: 弱毒株マラリア原虫の一次感染前後の脾臓のナイーブB細胞、活性化B細胞やマラリア原虫特異的な抗体産生細胞の細胞数について、フローサイトメーター、ELISPOT解析を行った。ただし、組織免疫染色は行っていないため、来年度に実行する予定である。
以上の結果より、おおむね順調していると自己判断した。
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| Strategy for Future Research Activity |
基本的には、予定の範囲内で研究を進める事が出来ているので、次年度も研究計画書通りに進めていく。
今年度に出来なかった研究を補いつつ、次年度の研究計画にのっとり研究を遂行していく。また、マラリア免疫記憶にγδ T細胞が重要な働きを担っていることを示すデータを得たことより、今後はその機能に関与する因子を特定することが、本研究の目的達成に重要となってくる。
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| Causes of Carryover |
次年度使用額が11,510円となってしまったが、残額がおおよそ１万円程度なので、ほぼ計画通りに使用出来たと考えている。不要な物品購入をして残高を0円調整しなくても、次年度に繰り越して使用出来ることが科研費基金化のメリットの１つであると理解しているので、その制度を利用させていただいた。その結果、研究費としてより有効的に使用出来ると考えている。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
次年度使用額11,510円は、物品費(消耗品)に追加して来年度使用する予定である。
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[Presentation] Plasmodium falciparum ガメトサイト形成に伴って特異的に発現される分子の網羅的解析.2016
Author(s)
朝日博子, 救仁郷圭祐, 竹田美香, 矢幡一英, 井上信一, 新倉 保, Indah S. Tantular, Fumihiko Kawamoto, 中澤秀介, 小林富美惠, 金子 修, 鈴木 穣
Organizer
第85回日本寄生虫学会大会
Place of Presentation
宮崎
Year and Date
2016-03-19 – 2016-03-20
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[Presentation] IL-17A/F遺伝子欠損マウスは長期喫煙曝露による気腔開大が抑制される2015
Author(s)
中村 益夫, 和田 裕雄, 佐田 充, 乾 俊哉, 中本 啓太郎, 檜垣 学, 宮東 昭彦, 井上 信一, 花輪 智子, 小林 富美恵, 菅間 博, 滝澤 始
Organizer
第38回日本分子生物学会年会/第88回日本生化学会大会
Place of Presentation
神戸
Year and Date
2015-12-01 – 2015-12-04
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