2015 Fiscal Year Research-status Report
抗デングウイルス化合物を用いたウイルス複製機構の解析
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15K19109
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| Research Institution | Tokyo Metropolitan Institute of Medical Science |
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Principal Investigator |
日紫喜 隆行 公益財団法人東京都医学総合研究所, ゲノム医科学研究分野, 主任研究員 (30535761)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | デングウイルス / 抗ウイルス / 複製機構 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究ではケミカルバイオロジー的手法を用いてデングウイルス複製に関与する宿主因子を同定し、ウイルス複製制御機構を明らかにすることを目的としている。今年度は薬理活性既知の市販化合物ライブラリーから抗デングウイルス活性を示す化合物の探索を行った。まずデングウイルスをHuh7細胞（ヒト肝癌由来細胞）に感染させ各化合物とともに共培養し、3日後の細胞を抗エンベロープ抗体で免疫染色した後に、フォーカス数の減少から抗デングウイルス活性の有無を判定した（1次スクリーニング）。次にフォーカス数の減少が細胞毒性によるものか判断するためにMTTアッセイ（細胞毒性試験）を行った（2次スクリーニング）。続いて、1次スクリーニングと同様にフォーカス法を低濃度の化合物で行ない、抗ウイルス活性の強い化合物の同定に成功した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
当初の計画通り抗ウイルス化合物の探索および同定に成功したことから、デングウイルス複製制御機構の解明に向けて着実に前進している。
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| Strategy for Future Research Activity |
本研究で新規同定した抗ウイルス化合物の標的宿主因子を明らかにし、宿主因子が関与するウイルス生活環の作用点の解析、細胞性・ウイルス性因子の細胞内動態の解析などを行うことにより、宿主因子によるウイルス複製制御機構の解明を試みる。
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| Causes of Carryover |
実験は計画通り進んだものの、候補因子のsiRNAのリストアップが不完全なため一部次年度に注文することにした。
また、年度内に論文が受理されなかったことから計上していた論文掲載費を次年度使用することにした。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
siRNAおよび論文の掲載費として使用する。
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Research Products
(8 results)
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[Journal Article] Generation of a neutralization-resistant CCR5 tropic SHIV-MK38 molecular clone, a derivative of SHIV-89.6.2016
Author(s)
Ishida Yuki, Yoneda Mai, Otsuki Hiroyuki, Watanabe Yuji, Kato Fumihiro, Matuura Kanako, Kikukawa Minako, Matsushita Shuzo, Hishiki Takayuki, Igarashi Tatsuhiko, Miura Tomoyuki.
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Journal Title
J Gen Virol
Volume: 97(5)
Pages: 1249-60
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Characterization of RyDEN (C19orf66) as an Interferon-Stimulated Cellular Inhibitor against Dengue Virus Replication.2016
Author(s)
Suzuki Youichi, Chin Weixin, Han Qien, Ichiyama Koji, Lee Ching, Eyo Zhin, Ebina Hirotaka, Takahashi Hirotaka, Takahashi Chikako, Tan Beng, Hishiki Takayuki, Ohba Kenji, Matsuyama Toshifumi, Koyanagi Yoshio, Tan Yee, Sawasaki Tatsuya, Chu Justin, Vasudevan Subhash, Sano Kouichi, Yamamoto Naoki.
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Journal Title
PLoS Pathog
Volume: 6;12(1)
Pages: e1005357
DOI
Peer Reviewed / Int'l Joint Research
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[Journal Article] Murine Herc6 plays a critical role in protein ISGylation in vivo and has an ISGylation independent function in seminal vesicles.2015
Author(s)
Arimoto Keiichiro, Hishiki Takayuki, Kiyonari Hiroshi, Abe Takaya, Cheng Chuyi, Yan Ming, Fan Jun, Futakuchi Mitsuru, Tsuda Hiroyuki, Murakami Yoshiki, Suzuki Hideyuki, Zhang Dong, Shimotohno Kunitada.
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Journal Title
J Interferon Cytokine Res
Volume: 35(5)
Pages: 351-8
DOI
Peer Reviewed / Int'l Joint Research
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