2015 Fiscal Year Research-status Report
哺乳類特異的な、RNAサイレンシングと抗ウイルス反応のクロストーク機構の解析
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15K19124
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
高橋 朋子 東京大学, 理学(系)研究科(研究院), 助教 (00738792)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | RNAサイレンシング / 抗ウイルス反応 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
small interfering RNA (siRNA)、microRNA (miRNA)、PIWI-interacting RNA (piRNA)といった内在性の小分子二本鎖RNAは、RNAサイレンシングという塩基配列特異的な遺伝子発現抑制機構によって、広く多様な遺伝子機能を制御していることが知られている。本研究課題は、哺乳類細胞における、これら内在性の小分子ノンコーディングRNAによるRNAサイレンシング機構と、ウイルスなどの外来性RNAより励起されるインターフェロン応答を伴った免疫応答機構のクロストークを明らかにすることを目的としている。RNA サイレンシング機構とこのようなウイルスなどの外来性RNAに対する免疫応答機構は、共に2本鎖RNAによって駆動される機構であり、両者の間にはクロストークがあると想定されるが、その機構についてはこれまで全く明らかではなかった。
2015年度はマウスノックアウト細胞とルシフェラーゼ遺伝子を用いたレポーターアッセイ系によるRNAサイレンシング活性の測定実験や、リアルタイムPCRによる目的の遺伝子の発現量変化を測定することで、これらの経路に関与する因子の詳細な機能解析を行った。さらに近年開発された、ゲノム編集ツールとして知られるCRISPR/Cas9システムにより目的の遺伝子のノックアウト細胞株を樹立した。2016年度はこれらの細胞株を用いた解析を継続して行う予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
CRISPR/Cas9システムによるノックアウト細胞株の樹立なども含め、2016年度にむけて順調に解析が進んだため。
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| Strategy for Future Research Activity |
2016年度は2015年度に樹立したノックアウト細胞株を用いて、より詳細な機能解析を行う予定である。
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