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2016 Fiscal Year Research-status Report

内耳におけるリン脂質代謝酵素と小胞体ストレス応答の解明

Research Project

Project/Area Number 15K20178
Research InstitutionYamagata University

Principal Investigator

松井 祐興  山形大学, 医学部, 非常勤講師 (60594322)

Project Period (FY) 2015-04-01 – 2018-03-31
Keywords内耳 / 蝸牛 / DGK / 内有毛細胞 / 外有毛細胞 / らせん神経節 / ジアシルグリセロールキナーゼ
Outline of Annual Research Achievements

正常モルモット蝸牛におけるDGK(ジアシルグリセロールキナーゼ)アイソザイムのRT-PCRを施行したところDGKα、DGKε、DGKζが強く発現していることが明らかとなった。DGKιでも弱い発現は見られたが、DGKβ、DGKγは検出感度以下であった。
正常モルモット蝸牛を縦断切片であるCryosection法で観察すると、1列の内有毛細胞と3列の外有毛細胞、そしてそれらを下支えする支持細胞の配列が見られた。有毛細胞マーカーの抗カルモジュリン抗体を用いて、内有毛細胞の細胞質、外有毛細胞の不動毛、クチクラ板における発現を確認した。正常コルチ器にけるDGKζ免疫反応は内有毛細胞、支持細胞の核内に強く検出された。またDGKζ免疫陽性反応は外有毛細胞の核内にも認められたが、内有毛細胞、支持細胞に比べると、その反応は弱いものであった。
コルチ器全体をWhole mount法で解析するとDGKζ免疫反応は内有毛細胞の核内に強く検出されるのに対し、外有毛細胞の核内では弱いシグナルであった。さらに支持細胞マーカーであるSox2と多重染色を行うと、有毛細胞の深層に位置するSox2陽性の支持細胞の核はDGKζ免疫陽性反応を示しており、DGKζは支持細胞の核内にも局在することが明らかとなった 。
らせん神経節では、Parvalbumin陽性のらせん神経節細胞の核内にDGKζ陽性像が検出されたが、その周囲を支えるグリア細胞にはDGKζ免疫反応は認められなかった。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

内耳におけるDGKεの検索を予定していたが、抗体の関係で、免疫染色含めた実験がすすまなかった。そこでDGKのアイソザイムであるDGKζの実験も行った。内耳におけるDGKζの局在を解析することができた。

Strategy for Future Research Activity

当初における内耳における小胞体ストレス反応を解析予定である。また、音響暴露によるストレス障害モデルを用いて、内耳におけるDGKεやDGKζの発現および機能解析を行う予定である。

Causes of Carryover

計画はすすんだが、遅れた分の試薬が未購入であるため、若干の次年度使用額が生じた

Expenditure Plan for Carryover Budget

蝸牛における関連抗体や小胞体ストレス関連の抗体およびそれぞれのPCR用プライマーを購入予定である。

  • Research Products

    (10 results)

All 2017 2016

All Journal Article (3 results) (of which Peer Reviewed: 1 results) Presentation (7 results)

  • [Journal Article] 初診時に脳神経症状を呈した上咽頭癌症例の検討2017

    • Author(s)
      松井祐興、那須隆、岡崎慎一、野田大介、岡崎雅、千田邦明、小池修治、欠畑誠治
    • Journal Title

      日本口腔・咽頭科学会雑誌

      Volume: 30 Pages: 111-116

  • [Journal Article] 咽頭から頸部皮下まで刺入した歯ブラシによる深達性穿通性損傷の小児例2017

    • Author(s)
      松井祐興、野田大介
    • Journal Title

      日本口腔・咽頭科学会雑誌

      Volume: 30 Pages: 143-147

  • [Journal Article] Arachidonoyl-Specific Diacylglycerol Kinase ε and the Endoplasmic Reticulum2016

    • Author(s)
      Tomoyuki Nakano, Hirooki Matsui, Toshiaki Tanaka, Yasukazu Hozumi, Ken Iseki, Kaneyuki Kawamae, and Kaoru Goto
    • Journal Title

      Front Cell Dev Biol.

      Volume: 4 Pages: 132

    • DOI

      10.3389/fcell.2016.00132

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 嚥下障害を主訴に受診した食道カンジダ症の2例2017

    • Author(s)
      松井祐興, 鈴木豊, 岡崎雅, 荒木直人
    • Organizer
      日本嚥下医学会
    • Place of Presentation
      学術統合センター(一橋講堂)、東京
    • Year and Date
      2017-02-24 – 2017-02-25
  • [Presentation] 術後経過観察中に頭蓋内膿瘍形成を認めた副鼻腔アスペルギルス症の1例2017

    • Author(s)
      松井祐興, 鈴木豊, 岡崎雅, 荒木直人
    • Organizer
      日本頭頸部外科学会
    • Place of Presentation
      学術統合センター(一橋講堂)、東京
    • Year and Date
      2017-02-09 – 2017-02-10
  • [Presentation] 内リンパ水腫を生じた外傷性外リンパ瘻の1例2016

    • Author(s)
      八木 千裕, 鈴木 豊, 松井 祐興, 中島 小百合
    • Organizer
      日本耳科学会
    • Place of Presentation
      ホテル国際21 長野
    • Year and Date
      2016-10-05 – 2016-10-08
  • [Presentation] 咽頭から頸部皮下まで刺入した歯ブラシ外傷の1例2016

    • Author(s)
      松井 祐興, 野田 大介, 岡崎 雅
    • Organizer
      日本口腔咽頭科学会
    • Place of Presentation
      松江テルサ、松江
    • Year and Date
      2016-09-08 – 2016-09-09
  • [Presentation] 頭部顔面皮膚悪性腫瘍の頸部リンパ節転移に対する頸部手術についての検討2016

    • Author(s)
      岡崎 慎一, 那須 隆, 岡崎 雅, 倉上 和也, 後藤 崇成, 松井 祐興, 欠畑 誠治
    • Organizer
      日本頭頸部外科学会
    • Place of Presentation
      ソニックシティ、さいたま
    • Year and Date
      2016-06-09 – 2016-06-10
  • [Presentation] 中耳内視鏡を用いた鼓膜形成術についての検討2016

    • Author(s)
      古川 孝俊, 渡辺 知緒, 伊藤 吏, 二井 一則, 阿部 靖弘, 窪田 俊憲, 松井 祐興, 欠畑 誠治
    • Organizer
      日本耳鼻咽喉科学会
    • Place of Presentation
      名古屋国際会議場、名古屋
    • Year and Date
      2016-05-18 – 2016-05-21
  • [Presentation] 遊離再建術を要する広範切除術を施行した頭頸部癌症例の術後急性期栄養2016

    • Author(s)
      那須 隆, 岡崎 慎一, 岡崎 雅, 松井 祐興, 倉上 和也, 後藤 崇成, 欠畑 誠治
    • Organizer
      日本耳鼻咽喉科学会
    • Place of Presentation
      名古屋国際会議場、名古屋
    • Year and Date
      2016-05-18 – 2016-05-21

URL: 

Published: 2018-01-16  

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