2018 Fiscal Year Annual Research Report
Post-translational modifications regulating the activity and function of heme oxygenase
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16K07307
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| Research Institution | Kurume University |
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Principal Investigator |
東元 祐一郎 久留米大学, 医学部, 教授 (40352124)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
坂口 達也 久留米大学, 医学部, 助教 (00757031)
松井 孝憲 久留米大学, 医学部, 講師 (10425233)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | 翻訳後修飾 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ヘムオキシゲナーゼ(HO)は、生体内でヘムを分解して代謝的にCOを発生する酵素として知られているが、過剰のCO生成は生体毒となるため、HO活性は厳密に制御されていると考えられる。本課題においては、その活性制御の鍵となる翻訳後修飾を探ることを目的としている。これまでHOは、ミクロソーム酵素として知られていたが、前年までも研究結果において、各種刺激によって、ミトコンドリア、核、カベオラなど、種々の細胞内小器官に局在することが明らかになった。今年度は、特に核に移行したHOの翻訳後修飾に着目して研究を進めた。A549細胞、およびNIH3T3細胞をHypoxiaで刺激した後、免疫沈降法によってHO-1を単離し、Peptide-Mass-Fingerprinting法によるMS解析を行った。その結果、核に局在するHO-1は膜結合部分が完全に排除されていることが確認された。MS/MS解析によって詳細な配列解析を行った結果、Ser275とPhe276のアミノ酸間で切断されていることが明らかになった。そこで、この部分の点変異体(S275A, F276L)を作成した。この変異体をA549細胞にトランスフェクトし、Hypoxiaで刺激した後、HO-1の局在を調べた結果、核内への局在は観測されなかった。また、昨年度同定した核内局在HOのアセチル化部位であるLys243とLys256の変異体(K243A, K256A)を作成し、その性質を調べた結果、野生型よりも細胞内寿命が長くなることが確認された。
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[Journal Article] RAGE-aptamer attenuates deoxycorticosterone acetate/salt-induced renal injury in mice.2018
Author(s)
aguchi K, Yamagishi SI, Yokoro M, Ito S, Kodama G, Kaida Y, Nakayama Y, Ando R, Yamada-Obara N, Asanuma K, Matsui T, Higashimoto Y, Brooks CR, Ueda S, Okuda S, Fukami K.
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Journal Title
Sci. Rep.
Volume: 8
Pages: 2686-2698
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Advanced glycation end products evoke inflammatory reactions in proximal tubular cells via autocrine production of dipeptidyl peptidase-4.2018
Author(s)
Kaifu K, Ueda S, Nakamura N, Matsui T, Yamada-Obara N, Ando R, Kaida Y, Nakata M, Matsukuma-Toyonaga M, Higashimoto Y, Fukami K, Suzuki Y, Okuda S, Yamagishi SI.
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Journal Title
Microvasc. Res.
Volume: 120
Pages: 90-93
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Crucial role of RAGE in inappropriate increase of smooth muscle cells from patients with pulmonary arterial hypertension.2018
Author(s)
Nakamura K, Sakaguchi M, Matsubara H, Akagi S, Sarashina T, Ejiri K, Akazawa K, Kondo M, Nakagawa K, Yoshida M, Miyoshi T, Ogo T, Oto T, Toyooka S, Higashimoto Y, Fukami K, Ito H.
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Journal Title
PLoS One.
Volume: 13
Pages: 1-11
DOI
Peer Reviewed
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