2017 Fiscal Year Research-status Report
微量リン脂質N-アシルホスファチジルエタノールアミンの酵素学的解析
| Project/Area Number |
16K08589
|
|---|
| Research Institution | Kagawa University |
|---|
Principal Investigator |
上田 夏生 香川大学, 医学部, 教授 (20193807)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
宇山 徹 香川大学, 医学部, 助教 (30457337)
坪井 一人 川崎医科大学, 医学部, 講師 (80346642)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
|
| Keywords | N-アシルホスファチジルエタノールアミン / リン脂質 / 酵素 / 脂質メディエーター / N-アシルエタノールアミン |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
N-アシル-ホスファチジルエタノールアミン（N-アシル-PE）は、ヒトを含む自然界に広く分布する膜リン脂質の一つであり、脂質メディエーターであるN-アシルエタノールアミンの前駆体であるとともに、それ自体も膜安定化作用などを示す。本研究課題の目的は、ほ乳動物でN-アシル-PEの代謝に関与する酵素の実体を明らかにすることで、不明な点の多いN-アシル-PEの生理的役割を解明することである。２年目の本年度は、以下の３点で進展を認めた。
1.N-アシル-PEをCa2+依存的に生成するN-アシル転移酵素の本体が細胞質ホスホリパーゼA2-epsilon（cPLA2-epsilon）であることがマウスで明らかにされたので、同酵素のヒトのオルソログのcDNAをクローニングし、ほ乳動物細胞で発現させた組換えタンパク質を用いて、N末端側のアミノ酸配列が異なる２種類のアイソフォームが、共にCa2+依存性N-アシル転移酵素として機能することを見出した。また、精製組換えタンパク質を用いて、マウス及びヒトのcPLA2-epsilon のCa2+依存的酵素活性が、ホスファチジルセリンの存在下で著しく増強することを発見した。
2.cPLA2-epsilonの遺伝子欠損マウスを入手し、繁殖に成功し、現在、脳などの組織中のN-アシル-PE及びN-アシルエタノールアミンの含量をコントロールマウスと比較検討する準備を進めている。
3.Ca2+非依存的N-アシル転移活性を示す代表的酵素であるPLAAT1の遺伝子欠損マウスの作出を行なっており、作業は順調に進んでいる。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
ヒトcPLA2-epsilonの２種類のアイソフォームが、共にCa2+依存性N-アシル転移酵素として機能することを世界に先駆けて発見し、報告した。また、マウス及びヒトの精製組換えcPLA2-epsilon のCa2+依存的酵素活性が、ホスファチジルセリンの存在下で著しく増強することを世界に先駆けて発見し、報告した。
|
| Strategy for Future Research Activity |
1.cPLA2-epsilonの遺伝子欠損マウスの繁殖に成功しているので、同マウスにおけるN-アシル-PE及びN-アシルエタノールアミンを含む脂質代謝の異常の有無やその他の表現型の解析を行う予定である。
2.現在PLAAT1の遺伝子欠損マウスの作出を行なっており、作業は順調に進んでいるので、表現型の解析まで持っていきたい。
|
| Causes of Carryover |
（理由）少額であるので使いきれなかった。
（使用計画）少額であるので次年度に使用する。
|
Research Products
(16 results)
-
-
-
-
-
-
-
-
[Presentation] cDNA cloning and characterization of long isoform of calcium-independent phospholipase A/acyltransferase-1 (PLAAT-1) that produces N-acyl-phosphatidylethanolamines2017
Author(s)
Hussain, Z., Uyama, T., Kawai, K., Rahman, I.A.S., Tsuboi, K., Araki, N., Ueda, N.
Organizer
第58回日本生化学会中国・四国支部例会
-
-
-
[Presentation] Calcium-independent generation of N-acylphosphatidylethanolamines (NAPEs) by phospholipase A/acyltransferase-1 isoforms in humans and mice2017
Author(s)
Hussain, Z., Uyama, T., Kawai, K., Rahman, I.A.S., Tsuboi, K., Araki, N., Ueda, N.
Organizer
第59回日本脂質生化学会
-
[Presentation] Characterization of isoforms of the calcium-independent N-acyltransferase PLAAT-1 in humans and mice2017
Author(s)
Uyama, T., Hussain, Z., Kawai, K., Rahman, I.A.S., Tsuboi, K., Araki, N., Ueda, N.
Organizer
27th Annual Symposium of the International Cannabinoid Research Society
Int'l Joint Research
-
-
-
-
