2019 Fiscal Year Annual Research Report
Identification and biological functions of lipid mediator binding proteins
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16K08596
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| Research Institution | Juntendo University |
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Principal Investigator |
奥野 利明 順天堂大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (60361466)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | GPCR / インバースアゴニスト / 構造活性相関 / BLT1 / LTB4 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
LTB4の高親和性受容体BLT1とインバースアゴニストBIIL260の複合体の結晶構造解析に成功した。その結果、BIIL260に含まれるベンズアミジン基が、BLT1のNa+ー水クラスター結合部位に結合していることがわかった。ベンザミジン基内のプロトン化アミジン基は、GPCRで高度に保存されているアスパラギン酸残基と2つのセリン残基にそれぞれ塩橋と水素結合を形成していた。また、ベンズアミジン基内のベンゼン環は、バリン残基とトリプトファン残基と相互作用していた。この相互作用は、Na+ー水クラスターの相互作用を模倣しているため、ベンズアミジン基はNa+ー水クラスターと同様に、不活性状態のBLT1の立体構造を安定化していると考えられた。したがって、ベンズアミジン基はGPCRの7回膜貫通ヘリックス束の活性状態への構造変化を阻害し、Na+ー水クラスターと同様に不活性状態の立体構造の維持に寄与すると考えられた。
また、以前報告されたシステイニルロイコトリエンC4,D4受容体(CysLT2)の恒常活性変異体を参考に、BLT1のヘリックス3のアミノ酸を点変異させたところ、TGFアルファ切断アッセイで恒常活性を示すことを明らかにした。このBLT1変異体を用いたTGFアルファ切断アッセイにおいて、BIIL260は容量依存的にインバースアゴニスト活性を抑制した。本研究によってBIIL260のインバースアゴニスト活性を直接証明することができた。
さらに本年度では、以前同定されたBLT1のインバースアゴニストの候補化合物が恒常活性を抑制するかどうかをTGF切断アッセイを用いて検討した。その結果、BIIL260と同等の活性を有数化合物を複数同定することができた。
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Research Products
(24 results)
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[Journal Article] Prostaglandin E2 and its receptor EP2 trigger signaling that contributes to YAP-mediated cell competition.2020
Author(s)
Ishihara E, Nagaoka Y, Okuno T, Kofuji S, Ishigami-Yuasa M, Kagechika H, Kamimura K, Terai S, Yokomizo T, Sugimoto Y, Fujita Y, Suzuki A, Nishina H.
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Journal Title
Genes Cells.
Volume: 25(3)
Pages: 197-214
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Cyclooxygenase inhibition in mice heightens adaptive- and innate-type responses against inhaled protease allergen and IL-33.2019
Author(s)
Maruyama N., Takai T., Kamijo S., Suchiva P., Ohba M., Takeshige T., Suzuki M., Hara M., Matsuno K., Harada S., Harada N., Nakae S., Sudo K., Okuno T., Yokomizo T., Ogawa H., Okumura K., Ikeda S.
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Journal Title
Allergy
Volume: 74
Pages: 2237-2240
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Presentation] Deficiency of BLT1, the high-affinity receptor for LTB4, alleviates allergic conjunctivitis in mice. 60th ICBL2019
Author(s)
Hirakata T., Lee C. H., Yasukawa K., Adachi K., Saeki K., Okuno T., Murakami A., Matsuda A., Yokomizo T..
Organizer
International Conference on the Bioscience of Lipids
Int'l Joint Research
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