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2017 Fiscal Year Research-status Report

Development of cell preparations and high/low molecular-weight therapeutics that exhibit synergistic effects with PD-1 immune checkpoint antibodies

Research Project

Project/Area Number 16K08844
Research InstitutionNagasaki University

Principal Investigator

田中 義正  長崎大学, 医歯薬学総合研究科(医学系), 准教授 (90280700)

Project Period (FY) 2016-04-01 – 2019-03-31
KeywordsPD-1 / PD-L1 / 免疫チェックポイント / シグナル / BcL-XL / ミトコンドリア / ビスホスホン酸 / 抗腫瘍作用
Outline of Annual Research Achievements

PD-1分子がPD-L1分子と結合し、シグナルが伝達されるとPI3Kシグナルが遮断され、Bcl-XLの機能阻害が起こる。これが、PD-1シグナルの本質的な作用であるが、このPD-1シグナルをブロックすると逆にBcl-XLの機能が回復し、エフェクターT細胞が保護される。これによりエフェクターT細胞数が増加し、抗腫瘍作用が増大する。このメカニズムがPD-1免疫チェックポイント阻害剤の抗腫瘍効果で大きな役割を持つならば、Bcl-XLの機能亢進作用を有する製剤と相乗効果を示すことになる。そこでBcl-XLの機能亢進剤とPD-1免疫チェックポイント阻害剤との相乗作用を検討した。Bcl-XLの機能亢進剤はミトコンドリアに作用し、Bcl-XLの発現を亢進し、細胞保護を行う分子である。このことから、Bcl-XLの機能亢進剤をPD-1免疫チェックポイント阻害剤と組み合わせることにより、どの程度の抗腫瘍効果の亢進があるのか詳しく検討した。まず、in vitroの検討においては、成人T細胞白血病患者由来の末梢血単核球に第4世代ビスホスホン酸とIL-2/IL-18を作用させ、10日後にATL細胞がどの程度減少しているか検討を行った。次にin vivoの検討においては、担がんマウスに抗PD-1抗体あるいは抗PD-L1抗体を投与し、その際、IL-18投与により腫瘍増殖がどの程度遅延するか検討を行った。また、Bcl-XLの機能亢進剤の4量体の作成を行った。そして、この4量体を用いて、PD-1免疫チェックポイント阻害剤との相乗作用に関して検討を行った。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

平成29年度は、PD-1免疫チェックポイント阻害剤と相乗作用を示す高分子製剤の探索を行った。PD-1免疫チェックポイント阻害剤は、Bcl-XLの機能阻害を解除する作用があるため、PD-1免疫チェックポイント阻害剤とBcl-XLの機能亢進剤を併用することにより、PD-1免疫チェックポイント阻害剤の抗腫瘍作用が亢進することが予想される。実際、マウスの系においては、PD-1免疫チェックポイント阻害剤とBcl-XL機能亢進剤との併用効果が観察された。平成29年度は、Bcl-XL機能亢進剤の効果をさらに改善するため、Bcl-XL機能亢進剤の4量体化を行った。大腸菌での発現系においては、GGGGSの5xリンカーを用いることにより、4量体形成タンパク質のN末端側にBcl-XL機能亢進作用を有するタンパク質を結合させた。また、培養細胞系では、EBNAタンパク質を導入したエピソーマルベクターを用いて、Bcl-XL機能亢進作用を有する4量体タンパク質の調製を行った。このようにして調製したBcl-XL機能亢進剤4量体とPD-1免疫チェックポイント阻害剤の相乗効果をin vitroの系で検討したところ、T細胞の抗腫瘍作用の亢進が確認された。さらに、in vivoのマウスの系で検討した結果、有意な奏功性の亢進が見られた。以上のように、当初予定していた、Bcl-XL機能亢進剤を用いたPD-1免疫チェックポイント阻害剤の機能亢進に成功した。以上のことより、平成29年度の研究は当初予定していたとおりに進行し、自己評価として、予定通りの進行と判断した。

Strategy for Future Research Activity

平成30年度は、PD-1免疫チェックポイント阻害剤と相乗作用を示す低分子製剤の探索を行う。まず、ヒト末梢血に第4世代ビスホスホン酸を作用させ、γδ型T細胞を増殖誘導し、エフェクター細胞として用いる。一方、PD-L1を強制発現させたヒトDaudiバーキットリンパ腫細胞に、テルピリジン誘導体を25μMで作用させ、RPMI1640培地で洗浄した細胞を標的細胞として用いる。アッセイ系としては、標的細胞105個に対して、エフェクター細胞105個を作用させ、60分後に細胞培養上清を回収する。ここに、ユーロピウムを添加することによりキレートを形成させる。このランタノイド系金属を含有するキレートは励起すると時間分解蛍光を発するためバックグラウンドの低い測定が可能になる。この系に低分子化合物ライブラリーを添加することにより、細胞障害性を亢進する化合物の探索を行う。具体的には、東京大学創薬機構の21万種の化合物、京都大学の3万種の化合物、大阪大学の6万種の化合物に加え、長崎大学に保有されている2万種の海洋微生物ライブラリーをスクリーニングすることにより、PD-1免疫チェックポイント阻害剤と併用効果が期待される化合物を取得する。この際、長崎大学に設置された大型創薬スクリーニング機器を用いて、効率的なスクリーニングを行う。このようにしてヒット化合物が得られた場合には、合成最適化を行い、さらに、安全薬理試験も行う。

  • Research Products

    (19 results)

All 2018 2017 Other

All Int'l Joint Research (2 results) Journal Article (11 results) (of which Int'l Joint Research: 8 results,  Peer Reviewed: 11 results,  Open Access: 11 results) Presentation (6 results) (of which Int'l Joint Research: 6 results,  Invited: 1 results)

  • [Int'l Joint Research] University of Iowa(米国)

    • Country Name
      U.S.A.
    • Counterpart Institution
      University of Iowa
  • [Int'l Joint Research] 浙江省疾病予防控制中心微生物所/浙江工業大学(中国)

    • Country Name
      CHINA
    • Counterpart Institution
      浙江省疾病予防控制中心微生物所/浙江工業大学
  • [Journal Article] Expansion of human γδ T cells for adoptive immunotherapy using a bisphosphonate prodrug2018

    • Author(s)
      Yoshimasa Tanaka, Kaoru Murata-Hirai, Masashi Iwasaki, Kenji Matsumoto, Kosuke Hayashi, Asuka Kumagai, Mohanad H. Nada, Hong Wang, Hirohito Kobayashi, Hiroshi Kamitakahara, Haruki Okamura, Tomoharu Sugie, Nagahiro Minato, Masakazu Toi and Craig T. Morita
    • Journal Title

      Cancer Science

      Volume: 109 Pages: 587-599

    • DOI

      10.1111/cas.13491

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Effect of IL-18 on the Expansion and Phenotype of Human Natural Killer Cells: Application to Cancer Immunotherapy2018

    • Author(s)
      Hiroaki Senju, Asuka Kumagai, Yoichi Nakamura, Hiroyuki Yamaguchi, Katsumi Nakatomi, Shota Fukami, Kengo Shiraishi, Yuka Harada, Mitsuhiro Nakamura, Haruki Okamura, Yoshimasa Tanaka and Hiroshi Mukae
    • Journal Title

      International Journal of Biological Sciences

      Volume: 14 Pages: 331-340

    • DOI

      10.7150/ijbs.22809

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Combined effects of neoadjuvant letrozole and zoledronic acid on γδT cells in postmenopausal women with early-stage breast cancer2018

    • Author(s)
      Sugie Tomoharu、Suzuki Eiji、Yamauchi Akira、Yamagami Kazuhiko、Masuda Norikazu、Gondo Naomi、Sumi Eriko、Ikeda Takafumi、Tada Harue、Uozumi Ryuji、Kanao Shotaro、Tanaka Yoshimasa、Hamazaki Yoko、Minato Nagahiro、Toi Masakazu
    • Journal Title

      The Breast

      Volume: 38 Pages: 114~119

    • DOI

      10.1016/j.breast.2017.12.017

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Frontline Science: IL-18 primes murine NK cells for proliferation by promoting protein synthesis, survival, and autophagy2018

    • Author(s)
      El-Darawish Yosif、Li Wen、Yamanishi Kyosuke、Pencheva Magdalena、Oka Naoto、Yamanishi Hiromichi、Matsuyama Tomohiro、Tanaka Yoshimasa、Minato Nagahiro、Okamura Haruki
    • Journal Title

      Journal of Leukocyte Biology

      Volume: 103 Pages: 1~12

    • DOI

      10.1002/JLB.1HI1017-396RR

    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Prediction Model for Antimalarial Activities of Hemozoin Inhibitors by Using Physicochemical Properties2018

    • Author(s)
      Mosaddeque Farhana、Mizukami Shusaku、Kamel Mohamed Gomaa、Teklemichael Awet Alem、Dat Truong Van、Mizuta Satoshi、Toan Dinh Van、Ahmed Ali Mahmoud、Vuong Nguyen Lam、Elhady Mohamed Tamer、Giang Hoang Thi Nam、Dang Tran Ngoc、Fukuda Michiko、Huynh Lam K.、Tanaka Yoshimasa
    • Journal Title

      Antimicrobial Agents and Chemotherapy

      Volume: 62 Pages: e02424~17

    • DOI

      10.1128/AAC.02424-17

    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Establishment of novel reporter cells stably maintaining transcription factor-driven human secreted alkaline phosphatase expression2018

    • Author(s)
      Riho Kurata, Asuka Kumagai, Xiaofeng Cui, Masamitsu Harada, Jun Nagai, Yasuhiro Yoshida, Kei-ichi Ozaki, Yoshimasa Tanaka, Tomo Yonezawa
    • Journal Title

      Current Pharmaceutical Biotechnology

      Volume: 19 Pages: 1~10

    • DOI

      10.2174/1389201019666180418093334

    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Enhancing adoptive cancer immunotherapy with Vγ2Vδ2 T cells through pulse zoledronate stimulation2017

    • Author(s)
      Nada Mohanad H.、Wang Hong、Workalemahu Grefachew、Tanaka Yoshimasa、Morita Craig T.
    • Journal Title

      Journal for ImmunoTherapy of Cancer

      Volume: 5 Pages: 9~31

    • DOI

      10.1186/s40425-017-0209-6

    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Anti-Tumor Activity and Immunotherapeutic Potential of a Bisphosphonate Prodrug2017

    • Author(s)
      Tanaka Yoshimasa、Iwasaki Masashi、Murata-Hirai Kaoru、Matsumoto Kenji、Hayashi Kosuke、Okamura Haruki、Sugie Tomoharu、Minato Nagahiro、Morita Craig T.、Toi Masakazu
    • Journal Title

      Scientific Reports

      Volume: 7 Pages: 5987~5999

    • DOI

      10.1038/s41598-017-05553-0

    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] TMPRSS2: A potential target for treatment of influenza virus and coronavirus infections2017

    • Author(s)
      Shen Li Wen、Mao Hui Juan、Wu Yan Ling、Tanaka Yoshimasa、Zhang Wen
    • Journal Title

      Biochimie

      Volume: 142 Pages: 1~10

    • DOI

      10.1016/j.biochi.2017.07.016

    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Structure-based drug discovery for combating influenza virus by targeting the PA?PB1 interaction2017

    • Author(s)
      Watanabe Ken、Ishikawa Takeshi、Otaki Hiroki、Mizuta Satoshi、Hamada Tsuyoshi、Nakagaki Takehiro、Ishibashi Daisuke、Urata Shuzo、Yasuda Jiro、Tanaka Yoshimasa、Nishida Noriyuki
    • Journal Title

      Scientific Reports

      Volume: 7 Pages: 9500~9511

    • DOI

      10.1038/s41598-017-10021-w

    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Live Cell Labeling with Terpyridine Derivative Proligands to Measure Cytotoxicity Mediated by Immune Cells2017

    • Author(s)
      Sakai Yuki、Mizuta Satoshi、Kumagai Asuka、Tagod Mohammed S. O.、Senju Hiroaki、Nakamura Tatsufumi、Morita Craig T.、Tanaka Yoshimasa
    • Journal Title

      ChemMedChem

      Volume: 12 Pages: 2006~2013

    • DOI

      10.1002/cmdc.201700626

    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Presentation] KID-001, a novel TDO/IDO inhibitor, suppresses the AHR-TIPARP pathway to reduce HBV replication in human hepatocytes2018

    • Author(s)
      Seiichi Sato, Taisho Yamada, Kenji Matsuno, Kai Li, Koichi Watashi, Takaji Wakita, Yoshimasa Tanaka, Yasuhito Tanaka, and Akinori Takaoka
    • Organizer
      6th Japan-Taiwan-Korea HBV Research Symposium 2018
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Immuno-modulatory effects of zoledronic acid on gamma delta T cells in postmenopausal women undergoing neoadjuvant endocrine therapy for early-stage breast cancer2018

    • Author(s)
      Tomoharu Sugie, Eiji Suzuki, Akira Yamauchi, Kazuhiko Yamagami, Norikazu Masuda, Naomi Gondo, Eriko Sumi, Takafumi Ikeda, Harue Tada, Ryuji Uozumi, Shotaro Kanao, Yoshimasa Tanaka, Yoko Hamazaki, Nagahiro Minato, Masakazu Toi
    • Organizer
      The 45th Naito Conference: Immunological and Molecular Bases for Cancer Immunotherapy
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Expansion of human γδ T cells for adoptive immunotherapy using a novel bisphosphonate prodrug2018

    • Author(s)
      Yoshimasa Tanaka, Masashi Iwasaki, Kosuke Hayashi, Kenji Matsumoto, Yuki Sakai, Mohammed S. O. Tagod, Asuka Kumagai and Craig T. Morita
    • Organizer
      The 8th gamma delta T Cell Conference
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Twin-studies on the role of non-genetic factors in T1D pathogenesis2017

    • Author(s)
      Li Li Ma, Yan Ling Wu, Ying Dong, Yoshimasa Tanaka, Wen Zhang
    • Organizer
      2017 2nd Inernational Conference on Biomedical and Biological Engineering
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Anti-Proliferative Activity of Benzamine Analogs in A549 Tumor Cells in Vitro2017

    • Author(s)
      Li Wen Shen, Yan Ling Wu, Min Chen, Yoshimasa Tanaka and Wen Zhang
    • Organizer
      2017 2nd Inernational Conference on Biomedical and Biological Engineering
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Combination Cancer Immunotherapy harnessing Immune Checkpoint Inhibitors2017

    • Author(s)
      Yoshimasa Tanaka
    • Organizer
      AMED-Leibniz Joint Workshop in the Life Sciences: Immune Regulation of Disease and Ageing
    • Int'l Joint Research / Invited

URL: 

Published: 2019-12-27   Modified: 2022-07-19  

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