Proteomic analysis of IgA immune complxes in IgA nephropathy

2018 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 16K09632
• Research Institution: Fujita Health University
• Principal Investigator: 高橋 和男 藤田医科大学, 医学部, 講師 (90631391)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 湯澤 由紀夫 藤田医科大学, 医学部, 教授 (00191479) ; 水野 智博 名城大学, 薬学部, 助教 (40711669)
• Project Period (FY): 2016-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: IgA腎症 / 免疫複合体 / プロテオミクス / 質量分析 / バイオマーカー開発

Outline of Annual Research Achievements

IgA腎症は，わが国に高頻度に認める慢性糸球体腎炎である。患者血液中に糖鎖異常IgA1を含む免疫複合体が形成され，腎糸球体メサンギウム領域に沈着し炎症を惹起すると考えられる。その血液中IgA免疫複合体の分子量は70万Da以上であり，IgA1はその他のタンパク質と結合していると考えられるが，その詳細な構造は明らかではない。そこで本研究は，高分解能質量分析計を用い，①血液中のIgA免疫複合体に含まれるタンパク質の同定・定量，②同定されたタンパク質・IgA1複合体の糸球体からの検出・定量を行い，IgA免疫複合体の沈着機序の解明を目指す。さらに，③血液中あるいは尿中のIgA免疫複合体の検出・定量方法を確立し，①-③を，新たな非侵襲的診断方法の開発につなげることを目的とする。
H29年度は，②タンパク質・IgA1複合体の糸球体からの検出・定量について，腎生検パラフィン保存の糸球体のタンパク質解析基盤を確立した。IgA腎症患者腎生検パラフィン切片よりLaser microdissection法にて糸球体を分離し，IgA腎症患者糸球体に有意に増加するタンパク質の同定を行った。①，②の結果より，一部のタンパク質はIgA腎症患者IgAと相互作用を持つタンパク質と共通であり，IgAと共に共沈着するタンパク質が明らかとなった。③これらタンパク質をターゲットとした新たな検出法の確立を目指すとともにその病的意義について臨床・基礎的な研究を進めている。

Remarks

これまでの研究成果を踏まえ更新を予定している

Research Products

• [Journal Article] Detection and identification of potential transglutaminase 2 substrates in the mouse renal glomeruli. (2018)
  • Author(s): Ito Y, Tatsukawa H, Yamaguchi H, Takahashi K, Hitomi K, Yuzawa Y.
  • Journal Title: Arch Biochem Biophys. Volume: 660 Pages: 11-19
  • DOI: 10.1016/j.abb.2018.10.001.
  • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Mass spectrometry-based approach for development of biomarkers in IgA nephropathy: a pilot trial. (2018)
  • Author(s): Kondo A, Takahashi K, Yamaguchi H, Yoshida Y, Mizuno T, Nakajima K, Hayashi H, Koide S, Inaguma D, Hasegawa M, Hiki Y, Yuzawa Y.
  • Journal Title: Fujita Medical Journal. Volume: 4 Pages: 36-41
  • DOI: 10.20407/fmj.4.2_36
  • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Identification and characterization of UDP-mannose in human cell lines and mouse organs: Differential distribution across brain regions and organs. (2018)
  • Author(s): Nakajima K, Kizuka Y, Yamaguchi Y, Hirabayashi Y, Takahashi K, Yuzawa Y, Taniguchi N.
  • Journal Title: Biochem Biophys Res Commun. Volume: 495 Pages: 401-407
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2017.10.173.
  • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Chondroitin sulfate protects vascular endothelial cells from toxicities of extracellular histones. (2018)
  • Author(s): Nagano F, Mizuno T, Mizumoto S, Yoshioka K, Takahashi K, Tsuboi N, Maruyama S, Yamada S, Nagamatsu T.
  • Journal Title: Eur J Pharmacol. Volume: 826 Pages: 48-55
  • DOI: 10.1016/j.ejphar.2018.02.043
  • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
• [Presentation] omparison of IgA1 hinge-region O-glycoforms between patients with IgA nephropathy and healthy subjects. (2018)
  • Author(s): Ohyama Y, Takahashi K, Yamaguchi H, Matsushita S, Nakajima K, Hayashi H, Koide S, Inaguma D, Hasegawa M, Renfrow MB, Novak J, Hiki Y, Yuzawa Y.
  • Organizer: Kidney Week 2018
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Comparison of IgA1 hinge-region O-glycoforms and Gd-IgA level between patients with IgA nephropathy and healthy subjects. (2018)
  • Author(s): Ohyama Y, Takahashi K, Yamaguchi H, Matsushita S, Nakajima K, Hayashi H, Koide S, Inaguma D, Hasegawa M, Renfrow MB, Novak J, Hiki Y, Yuzawa Y.
  • Organizer: International IgA Nephropathy Symposium 2018
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Detection and Identification of Potential Transglutaminase Substrates in Mouse Renal Glomeruli. (2018)
  • Author(s): Ito Y, Tatsukawa H, Yamaguchi H, Takahashi K, Yuzawa Y, Hitomi K.
  • Organizer: Gordon Research Conference on Transglutaminases in Human Disease Processes. 2018
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Analysis of IgA1 hinge-region O-glycoforms of multiracial healthy subjects by mass spectrometry. (2018)
  • Author(s): Ohyama Y, Takahashi K, Matsushita S, Yamaguchi H, Nakajima K, Mizuno T, Hayashi H, Koide S, Inaguma D, Hasegawa M, Renfrow MB, Novak J, Hiki Y, Yuzawa Y.
  • Organizer: ISN Frontiers Meeting 2018
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] 腎疾患におけるプロテオーム解析を用いたバイオマーカー開発とその展望 (2018)
  • Author(s): 高橋 和男，湯澤 由紀夫
  • Organizer: 第61回日本腎臓学会学術総会 2018
• [Presentation] DKDの新規バイオマーカー開発 (2018)
  • Author(s): 中嶋 和紀，高橋 和男，湯澤 由紀夫
  • Organizer: 第48回日本腎臓学会西部学術大会 2018
• [Presentation] 糖尿病モデルマウスにおけるキヌレニン経路代謝物の腎組織イメージング質量分析． (2018)
  • Author(s): 松下 祥子，高橋 和男，伊藤 辰将，山本 康子，藤垣 英嗣，毛利 彰宏，中嶋 和紀，尾之内 高慶，辰川 英樹，釘田 雅則，長尾 静子，人見 清隆，齋藤 邦明，瀬藤 光利，湯澤 由紀夫．
  • Organizer: 第61回日本腎臓学会学術総会 2018
• [Presentation] 糖脂質合成酵素阻害剤はグルコース代謝を介してADPKDの病態を抑制する． (2018)
  • Author(s): 中嶋 和紀，石橋 洋平，釘田 雅則，中尾 静羽，高橋 和男，永松 正，長尾 静子，湯澤 由紀夫．
  • Organizer: 第61回日本腎臓学会学術総会 2018
• [Presentation] 健常人ＩｇＡ１糖鎖構造人種間比較． (2018)
  • Author(s): 大山 友香子，高橋 和男，山口 央輝，松下 祥子，中嶋 和紀，林 宏樹，小出 滋久，稲熊 大城，長谷川 みどり，比企 能之，湯澤 由紀夫．
  • Organizer: 第61回日本腎臓学会学術総会 2018
• [Presentation] 腎糸球体におけるタンパク質架橋接着酵素 (Transglutaminase 2) の基質候補探索と同定． (2018)
  • Author(s): 伊藤 辰将, 辰川 英樹, 山口 央輝, 高橋 和男, 人見 清隆, 湯澤 由紀夫．
  • Organizer: 第9回分子腎臓フォーラム 2018
• [Presentation] マウス腎糸球体内で架橋される組織型トランスグルタミナーゼ基質候補タンパク質の網羅的解析． (2018)
  • Author(s): 伊藤 辰将，辰川 英樹，山口 央輝，高橋 和男，人見 清隆，湯澤 由紀夫．
  • Organizer: 第43回日本医用マススペクトル学会年会 2018
• [Presentation] 腎糸球体病変特異的なタンパク質の解析． (2018)
  • Author(s): 松下 祥子，高橋 和男，大山 友香子，山口 央輝，中嶋 和紀，湯澤 由紀夫．
  • Organizer: 第45回BMSコンファレンス 2018
• [Presentation] 段階的脱グリコシル化法を用いた正常人IgA1 O結合型糖鎖構造の人種間比較． (2018)
  • Author(s): 大山 友香子，高橋 和男，山口 央輝，加藤 彰浩，松下 祥子，吉田 祐理，水野 智博，深町 幸宏，横井 靖人，比企 能之，湯澤 由紀夫．
  • Organizer: 日本質量分析学会・日本プロテオーム学会2018年合同大会 2018
• [Presentation] IgA1 O結合型糖鎖構造の人種間比較． (2018)
  • Author(s): 大山 友香子，高橋 和男，松下 祥子，山口 央輝，Matthew B. Renfrow，Jan Novak，比企 能之，湯澤 由紀夫．
  • Organizer: 第4１回ＩｇＡ腎症研究会学術集会 2018
• [Remarks] 藤田医科大学医学部腎臓内科学IgA腎症研究グループ
  • URL: http://fujita-jin.blogat.jp/blog/2013/02/iga-f52d.html