Wnt/β-catenin経路を介した分子標的治療の開発と抗腫瘍メカニズムの解明

2017 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 16K10850
• Research Institution: Kanazawa University
• Principal Investigator: 山本 憲男 金沢大学, 医薬保健学総合研究科, 特任教授 (90332668)
• Project Period (FY): 2016-04-01 – 2020-03-31
• Keywords: GSK3β阻害剤 / 軟部肉腫

Outline of Annual Research Achievements

平成29年度は軟部肉腫に対するGSK3β阻害剤の効果を検討し、その途中段階まで結果が揃ってきたので以下に報告する。
アポトーシスの評価はCleaved caspase 3で評価したところ、阻害剤投与により、Cleaved caspase 3の発現が亢進し、その結果、阻害剤投与は腫瘍細胞のアポトーシスを促すといったことが示唆された。これに加え、昨年度報告したWST-8 assay（細胞生存能）、EdU assay（細胞増殖能）の結果を、RNA干渉試験でも同じように得られるのかを確認した。そして、GSK3βをノックダウンさせた細胞において、GSK3βの発現は抑制され、細胞増殖・生存能が抑えられ、アポトーシスは誘導されるといった、阻害剤投与群と同様の結果が得られた。続いてin vivoを行った。in vivoにおいては滑膜肉腫細胞株SYO-1と線維肉腫細胞株HT1080をヌードマウスに移植し、阻害剤を投与した。4週の経過で、有意に阻害剤投与群で腫瘍の増大を抑制していることを示した。さらに切除腫瘍の病理組織学的検討を行ったところ、腫瘍細胞の壊死像が認められた。以上より、動物実験においてもin vitroの実験と同様、GSK3β阻害剤は軟部肉腫に対して有効な効果を示すことを明らかにした。
この先は、GSK3β阻害剤の作用機序について検討して行く予定であり、そのターゲットとして細胞周期や細胞浸潤能などを考えているところである。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

現在のところ研究は概ね予定通りに進行中であり，軟部肉腫におけるGSK3β阻害剤の効果を，その作用機序とともに明らかにできつつある．

Strategy for Future Research Activity

この先は、GSK3β阻害剤の作用機序について検討して行く予定であり、そのターゲットとして細胞周期や細胞浸潤能などを考えているところである。可視化モデルについては，蛍光蛋白導入細胞を樹立中であり，引き続き遺伝子導入実験を行っていく予定である．

Causes of Carryover

概ね計画通りに研究は進行中であり，次年度使用額が生じているが，この予算については，細胞周期解析のための試薬購入，実験動物の追加購入，成果の発表，あるいは論文作成費に使用する予定となっている．