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2016 Fiscal Year Research-status Report

全身麻酔薬による臓器保護作用に関与するマイクロRNAおよびその標的遺伝子の同定

Research Project

Project/Area Number 16K10976
Research InstitutionKawasaki Medical School

Principal Investigator

片山 浩  川崎医科大学, 医学部, 教授 (90161067)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 千葉 義彦  星薬科大学, 薬学部, 准教授 (00287848)
花崎 元彦  国際医療福祉大学, 国際医療福祉大学病院, 教授 (60379790)
Project Period (FY) 2016-04-01 – 2019-03-31
KeywordsマイクロRNA / 全身麻酔 / 臓器保護
Outline of Annual Research Achievements

本研究課題の初年度に当たる平成28年度は、腎虚血再灌流(IR)傷害時に発現変動するmicroRNA (miRNAs)および遺伝子の同定を試みた。
1)雄性Wistarラットを3群(対照(C)群、虚血再潅流(IR)群、セボフルラン(S)群)に分けた。ペントバルビタールで麻酔し動静脈路確保、気管切開を行った後に人工呼吸を開始した。開腹して両側腎門部をクランプ(=虚血、30分)、解除(=再潅流、1時間)の後に両腎を摘出し一方はRNA later液中に保存、もう一方は凍結保存した。C群は回復操作のみを行った。またS群はIR群を同様のプロトコルだが気管切開後の全行程で2%セボフルランを付加した。
2)3群から得られた腎組織よりsmall RNAを含むtotal RNAを抽出し、そのmiRNAマイクロアレイ解析結果をクラスタリング解析したところ、12分子種のmiRNAsについて興味深い発現変動が認められた。この12分子種のmiRNAsについて、IR群において4分子種の発現低下が認められ、そのうちの1分子種についてS群におけるリバースが確認できた。一方、IR群において8分子種の発現増加が認められ、そのうちの4分子種についてS群におけるリバースが確認できた。
3)現在、これら発現変動の認められたmiRNAsについてリアルタイムPCR法を用いたvalidationを行うとともに、遺伝子発現変動についてもDNAチップを用いて解析中である。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

腎虚血再灌流(IR)傷害時に発現変動するmiRNAsについて、網羅的におおよその見当を付けることができた。

Strategy for Future Research Activity

アレイ解析の結果、今回用いたクラスタリング解析の基準からは外れているが、二倍以上の発現変動が認められたmiRNA分子種も存在しており、これらの分子種についてもリアルタイムPCR法を用いて再確認して、変動分子種を網羅する。さらに、発現変動遺伝子の網羅的解析も行い、バイオインフォマティック解析の情報も合わせてmiRNAのターゲット遺伝子を予測して実際に同定するとともに、全身麻酔薬の効果について解析する予定である。

Causes of Carryover

腎虚血再灌流(IR)傷害モデルからの腎組織採取において、出血およびそれに伴う低血圧、体温上昇もしくは低下など、実験環境が大きく影響を与えうる因子を極力除いたサンプルを得ることに注力した。
このため、比較的に安価で行える動物実験の比重が高まり、その後、比較的に高価であるtotal RNA抽出、miRNAマイクロアレイ解析、クラスタリング解析などを年度の後半に行った。サンプル採取に万全を期した結果、これらの解析の開始時期が当初より若干遅れたことが次年度使用額を生じた理由である。

Expenditure Plan for Carryover Budget

miRNAマイクロアレイ解析、クラスタリング解析、リアルタイムPCR法など各種の解析を行う予定である。

  • Research Products

    (12 results)

All 2017 2016 Other

All Presentation (10 results) (of which Invited: 1 results) Book (1 results) Remarks (1 results)

  • [Presentation] ラット虚血再灌流傷害肺における miR-133a-3p 発現低下による RhoA/Rho-kinase 系亢進の可能性2017

    • Author(s)
      有村 美紀, 安藤 友美, 花崎元彦, 片山 浩, 千葉 義彦
    • Organizer
      日本薬学会 第137年会
    • Place of Presentation
      東北大学川内北キャンパス(仙台市)
    • Year and Date
      2017-03-25
  • [Presentation] ラット虚血再灌流傷害肺における発現変動遺伝子の網羅的解析2017

    • Author(s)
      安藤 友美, 有村 美紀, 花崎元彦, 片山 浩, 千葉 義彦
    • Organizer
      日本薬学会 第137年会
    • Place of Presentation
      東北大学川内北キャンパス(仙台市)
    • Year and Date
      2017-03-25
  • [Presentation] マウスアレルギー性喘息時の過敏性気管支平滑筋における long noncoding RNAs 発現の変化2017

    • Author(s)
      千葉 義彦, 安達 幸佳, 須藤 航, 山根 大和, 花崎元彦, 片山 浩, 酒井 寛泰
    • Organizer
      日本薬学会 第137年会
    • Place of Presentation
      東北大学川内北キャンパス(仙台市)
    • Year and Date
      2017-03-25
  • [Presentation] トロンボモジュリン(rhTM)及びアンチトロンビン(AT)による持続的血液ろ過透析フィルターライフタイムの影響2017

    • Author(s)
      日根野谷 一, 池本直人, 那須敬, 福田直樹, 片山浩, 西海創
    • Organizer
      第44回日本集中治療医学会学術集会
    • Place of Presentation
      ロイトン札幌、さっぽろ芸文館、札幌市教育文化会館、札幌プリンスホル(北海道札幌市)
    • Year and Date
      2017-03-11
  • [Presentation] 吐下血により救急搬送され非外傷性脾破裂が判明した一救命例2017

    • Author(s)
      池本直人, 片山浩, 吉田悠紀子, 福田直樹, 那須敬, 日根野谷 一, 落合陽子,花崎元彦
    • Organizer
      第44回日本集中治療医学会学術集会
    • Place of Presentation
      ロイトン札幌、さっぽろ芸文館、札幌市教育文化会館、札幌プリンスホル(北海道札幌市)
    • Year and Date
      2017-03-10
  • [Presentation] 門脈気腫症4例の検討2016

    • Author(s)
      池本直人, 片山浩, 吉田悠紀子, 福田直樹, 那須敬, 落合陽子,花崎元彦
    • Organizer
      日本臨床麻酔学会第36回大会
    • Place of Presentation
      高知市文化プラザかるぽーと、ホテル日航高知旭ロイヤル、高知県立県民文化ホール(高知県高知市)
    • Year and Date
      2016-11-05
  • [Presentation] α-グルコシダーゼ阻害薬による門脈気腫症の一例2016

    • Author(s)
      落合陽子, 池本直人, 吉田悠紀子, 福田直樹, 那須敬, 片山浩
    • Organizer
      日本麻酔科学会 中国・四国支部 第53回学術集会
    • Place of Presentation
      岡山コンベンションセンター(岡山県岡山市)
    • Year and Date
      2016-09-10
  • [Presentation] 劇症型A群β溶連菌感染による敗血症性DICに対する遺伝子組換えヒト可溶性トロンボモジュリン(rhTM)及びアンチトロンビンIII(AT‐III)製剤投与の効果2016

    • Author(s)
      日根野谷一, 池本直人, 吉田悠紀子, 落合陽子, 片山浩
    • Organizer
      日本麻酔科学会 中国・四国支部 第53回学術集会
    • Place of Presentation
      岡山コンベンションセンター(岡山県岡山市)
    • Year and Date
      2016-09-10
  • [Presentation] 換気量測定可能な呼吸モニターにより挿管時期の決定ができた一症例2016

    • Author(s)
      那須敬, 福田直樹, 日根野谷一, 落合陽子, 花崎元彦, 片山浩
    • Organizer
      日本麻酔科学会 中国・四国支部 第53回学術集会
    • Place of Presentation
      岡山コンベンションセンター(岡山県岡山市)
    • Year and Date
      2016-09-10
  • [Presentation] AKIの診断と管理2016

    • Author(s)
      片山浩
    • Organizer
      日本麻酔科学会第63回学術集会
    • Place of Presentation
      福岡国際会議場、マリンメッセ福岡、福岡サンパレスホテル&ホール、 ホテル日航福岡(福岡県福岡市)
    • Year and Date
      2016-05-26
    • Invited
  • [Book] LiSA2017

    • Author(s)
      片山浩
    • Total Pages
      pp268‐272
    • Publisher
      メディカルサイエンスインターナショナル
  • [Remarks] 教室紹介 > 麻酔・集中治療医学3教室

    • URL

      https://www.kawasaki-m.ac.jp/med/study/info.php?id=449

URL: 

Published: 2018-01-16  

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