2018 Fiscal Year Research-status Report
妊娠の成立と維持に関する新しい免疫担当細胞の同定と機能解析
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16K11078
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Research Institution | Hyogo Medical University |
Principal Investigator |
福井 淳史 兵庫医科大学, 医学部, 准教授 (00321969)
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Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2020-03-31
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Keywords | NK細胞 / 不妊症 / 着床不全 / 不育症 / NKp46 / CD16 / サイトカイン / 精液 |
Outline of Annual Research Achievements |
子宮内膜および末梢血におけるNK細胞表面に発現する活性性受容体であるCD16およびNKp46と他の活性性あるいは抑制性受容体との共発現を測定し、その生理学的意義、不妊症(着床不全)・不育症への関与を解明すること、さらには免疫担当細胞の妊娠の成立および維持に関する役割を明らかにすることを目的として、以下の検討を行った。 施設倫理審査委員会の承認と患者への説明と同意のもと、子宮内膜組織を着床不全患者、不育症患者より採取した。子宮内膜組織は組織破砕機を用いて物理的に単細胞レベルまで粉砕し、NK細胞浮遊液を作成のうえ、子宮内膜NK細胞表面抗原(CD16(活性性)、CD56、NKp46(活性性)、CD158a(抑制性)、NKG2A(抑制性)、NKG2C(活性性)、NKG2D(活性性))発現およびサイトカイン産生(IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-10)をフローサイトメトリーにて測定した。NK細胞は、CD16+/CD56dim細胞の割合の高低により2群に分類した。 CD16brightNK細胞におけるNKp46+細胞の割合はCD16-NK細胞、CD16dimNK細胞のそれに比して有意に低値であった。さらにCD16brightNK細胞とCD16-NK細胞、CD16dimNK細胞とではIFN-γ、TNF-α産生が異なっていた。以上よりCD16brightNK細胞とCD16dimNK細胞とではその機能が異なることが示された。 また免疫担当細胞の生理的サイトカイン産生測定方法の開発を目的に、精液を用いて子宮内膜NK細胞を刺激し、生理的かつカップル特異的なNK細胞産生サイトカインを測定しうることを明らかにした。さらにサイトカイン産生およびサイトカイン産生比は、免疫異常の有無で異なることを示した。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
末梢血、子宮内膜を用いたNK細胞における活性性および抑制性受容体共発現測定およびサイトカイン産生は行い得た。また精液による子宮内膜各種受容体による細胞分離後のサイトカイン産生が現在進行中である。翌年度以降も継続して測定していく内容であるので、翌年度予定のものに加え継続して検討を行っていきたい。
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Strategy for Future Research Activity |
末梢血、子宮内膜を用いたNK細胞における活性性および抑制性受容体共発現測定およびサイトカイン産生は行い得た。精液による子宮NK細胞刺激によるカップル特異的なサイトカイン産生も測定し得た。しかし、各種受容体による細胞分離後のサイトカイン産生が十分な結果を出し得ていない。翌年度以降も継続して測定していく予定である。
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Causes of Carryover |
研究費を消耗品購入、旅費、その他に充てたが、実験用試薬などの購入に急を要さなかったため、また人件費も必要としなかったため次年度使用へとまわした。次年度は抗体などの物品費、成果報告のための旅費、投稿費などに使用する予定である。
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Research Products
(19 results)