2018 Fiscal Year Research-status Report
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16K11447
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| Research Institution | Kyushu University |
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Principal Investigator |
張 旌旗 九州大学, 歯学部, 技術専門員 (80380707)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
清島 保 九州大学, 歯学研究院, 教授 (20264054)
城戸 瑞穂 佐賀大学, 医学部, 教授 (60253457)
和田 裕子 九州大学, 歯学研究院, 助教 (70380706)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | エナメル芽細胞 / TPPチャネル / エナメル質形成不全 / 歯 / 歯の発生 / 組織学 / 走査電子顕微鏡 / 口腔解剖学 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
歯科臨床では、多様なエナメル質形成不全に遭遇するが、その機構は未だ明らかとは言えない。私たちは口腔上皮に高発現している温度感受性TRPV3およびエナメル芽細胞に存在するメカノセンサーであるTRPV4(transient receptor potential vanilloid 3,4)チャネルがエナメル質の形成調節に関与するとの仮説を立て、野生型（WT）とTRPチャネル遺伝子欠損マウス（V3KO、V4KO）を用いて、エナメル質形成への影響を調べた。その結果、WTに比べてV3KO、V4KOマウスは歯のエナメル質石灰化が不十分であることを見いだした。その機序を調べるため、V3KOおよびV4KOがマウス歯エナメル芽細胞におけるエナメルタンパクの発現および歯エナメル質のカルシウム、リン、マグネシウム分布に及ぼす影響について検討した。
我々は生後21日齢のWTおよびV3KO、V4KOマウスの切歯、臼歯を用いて、アメロゲニン(AMEL)、アメロブラスチン(AMBN)、エナメリン(ENAM)抗体による免疫染色を行った。また、エナメル質のミネラル分布状況についてX線マイクロアナライザー（EPMA）を用いて解析を行った。
その結果、WTおよびV3KO、V4KOマウスの歯はいずれもエナメルタンパクの免疫陽性反応が確認された。WTマウスに比べてV3KO、V4KOマウスのアメロブラスチン発現が弱い傾向が示した。一方、EPMA解析では、WTと比較してV3KOマウスは、臼歯および切歯エナメル質のカルシウム、リン、マグネシウム濃度が有意に低下した。V4KOマウスにおいても同様な結果が得られた。これらのことから、TRPチャネルはエナメル質形成に影響を与える可能性が示唆された。今後はさらにMicro CTによるエナメル質形成密度の解析やEDXによるカルシウム、リン、マグネシウムの元素分析を進めていく予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
H30年度は歯の発生におけるミネラル成分沈着へのTRPチャネル関与についてWTとKOマウスを使ってMicro CTの解析を予定したが、動物飼育室の感染により、動物は殺処分され、施設の改修に時間がかかったため、年度内の研究がやや遅れている。
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| Strategy for Future Research Activity |
今年度はWTとTRPV3、TRPV4チャネルKOマウスを使って歯の発生におけるミネラル成分沈着へのTRPチャネル関与についてMicro CTを用いてエナメル質形成の密度を解析し、さらにSEMによるエナメル質形成の元素分析を行う予定する。
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| Causes of Carryover |
H30年度は歯の発生におけるミネラル成分沈着へのTRPチャネル関与についての解析実験が遅れたため、次年度の使用額が生じた。今年度は本研究課題の最終年度に当たり、残った使用額は追加実験と解析などの費用として充当する。さらに学会発表および論文作成についても使用する計画である。
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