2017 Fiscal Year Research-status Report

薬物担持担体と幹細胞を用いた広域顎口腔組織欠損再生

Research Project

Project/Area Number	16K11667
Research Institution	Osaka Dental University
Principal Investigator	馬場俊輔大阪歯科大学, 歯学部, 教授 (40275227)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	橋本典也大阪歯科大学, 歯学部, 准教授 (20228430) 本田義知大阪歯科大学, 歯学部, 准教授 (90547259)
Project Period (FY)	2016-04-01 – 2019-03-31
Keywords	bFGF
Outline of Annual Research Achievements	線維芽細胞成長因子（bFGF) のヘパリンとの親和性に着目し、ヘパリンをあらかじめαリン酸三カルシウム多孔質体(α-TCP)に化学的に結合させた薬物徐放担体を開発した。本課題では、これを担体としてヒトiPS細胞や脂肪細胞から誘導した間葉系幹細胞と組み合わせて口腔癌等によって生じた広域顎口腔組織欠損の顎骨再生を行うための基礎研究を行うことである。イヌ歯周疾患モデルで3 ヶ月での歯周組織再生（前臨床試験）を目的として、上下顎とも健全な永久歯列を有するビーグル犬9 頭に実施した。実験動物に全身麻酔を施し、第1大臼歯と第3小臼歯は抜歯する。下顎第2 前臼歯遠心と第4 前臼歯近心に頬舌幅3.5 mm、近遠心幅3.5 mm、深さ5 mm の2 壁性骨欠損を作製後、骨欠損部および露出歯根面の十分な掻把を行い、同骨欠損底部を印記する目的でラウンドバーを用いて根面にノッチを付与した。群分けとしては、（a） α-TCP/ヘパリン/bFGF群（b）α-TCP群とした。実験期間は2、4、12週とした。ビーグル犬の下顎骨に二壁性骨欠損を形成し、実験群はα-TCP/ヘパリン/bFGF、対照群はα-TCPを填入した。術後2、 4、 8週に安楽死させ、マイクロCTで骨のパラメーター解析を行った。HE染色、アザン染色、免疫染色による組織学的評価を行った。実験群は対照群に比べて、術後2、 4週で骨塩量が有意に高かった (p < 0.05)。実験群では2週でα-TCPの吸収と周囲の新生骨、新生セメント質、シャーピー線維を伴った歯根膜構造を認めた。イヌ下顎骨二壁性骨欠損モデルにおいて、bFGF固定化α-リン酸三カルシウムは早期に歯周組織再生を促すことが示唆された。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned. Reason イヌ歯周疾患モデルで（前臨床試験）の結果が報告できたから。
Strategy for Future Research Activity	間葉系幹細胞を薬物徐放担体中で培養を行い、骨芽細胞分化の評価を行う。
Causes of Carryover	（理由）動物実験を中心に実施したので、細胞培養に関する支出が少なかったため。（使用計画）薬物担持担体に間葉系幹細胞を播種し、骨芽細胞分化や歯根膜細胞分化の評価を行う。