2016 Fiscal Year Research-status Report
内在性antisense RNAによるセレノプロテインP翻訳制御機構の解析
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16K18707
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| Research Institution | Doshisha University |
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Principal Investigator |
三田 雄一郎 同志社大学, 研究開発推進機構, 特別研究員 (70609122)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | noncoding RNA / Selenoprotein P / SECIS |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本年度はnon coding RNA-CCDC152-によるSelenoprotein P (SeP)の翻訳抑制メカニズム解析を中心に研究を行った。初めに、CCDC152がSeP mRNAと直接結合できるかをビオチン化cdc152を用いたPull down assay法で解析を行ったところ、CCDC152とSeP mRNAは直接結合する事が分かった。それに対し、他のSECIS配列を持つmRNA (glutathione peroxidase 1 (GPx1)等）とCCDC152は結合していなかった。次に、SeP mRNAに対する影響を検証した。その結果、CCDC152はSeP mRNAの分解速度およびmRNAの核外移行には影響を与えない事が分かった。翻訳段階のmRNA量を調べるためにポリソーム解析をおこなったところ、CCDC152を過剰発現させることによりSeP mRNAとリボソームの結合が阻害されるというデータが得られた。その原因として、Se含有タンパク質の翻訳に必須のタンパク質であるSBP2とSeP mRNAの結合がCCDC152過剰発現により減弱している事が確認された。これらの結果から、CCDC152によるSePのmRNA量の変化を伴わないタンパク質量の減少のメカニズムは、SeP mRNAとSBP2との結合を阻害する事による翻訳抑制が原因であると考えられる。
CCDC152の翻訳抑制メカニズムの解明と並行してSeP以外のSECISに与える影響を検討した。その結果、CCDC152はGPx1, TR1などの他のSECISを持つSe含有タンパク質のタンパク質量・mRNA量には影響を与えなかった。そのため、CCDC152の影響はSECISに対するものではなくSeP mRNA特異的であることが分かった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
CCDC152によるSeP転写後調整メカニズムが、SeP mRNAのSECISとSBP2との結合阻害である事が確認できたため。
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| Strategy for Future Research Activity |
現在、CCDC152による翻訳抑制に必要な配列の絞り込みを行っており、同定され次第、他のSECISを持つmRNAに対しても同様の結果が得られるか検証を行う。
並行して、CCDC152の発現制御メカニズムの解析も行う。
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[Journal Article] D-Glutamate is metabolized in the heart mitochondria.2017
Author(s)
Ariyoshi M, Katane M, Hamase K, Miyoshi Y, Nakane M, Hoshino A, Okawa Y, Mita Y, Kaimoto S, Uchihashi M, Fukai K, Ono K, Tateishi S, Hato D, Yamanaka R, Honda S, Fushimura Y, Iwai-Kanai E, Ishihara N, Mita M, Homma H, Matoba S.
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Journal Title
Scientific Reports
Volume: 7
Pages: 43911
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Deficiency of the hepatokine selenoprotein P increases responsiveness to exercise in mice through upregulation of reactive oxygen species and AMP-activated protein kinase in muscle.2017
Author(s)
Misu H, Takayama H, Saito Y, Mita Y, Kikuchi A, Ishii KA, Chikamoto K, Kanamori T, Tajima N, Lan F, Takeshita Y, Honda M, Tanaka M, Kato S, Matsuyama N, Yoshioka Y, Iwayama K, Tokuyama K, Akazawa N, Maeda S, Takekoshi K, Matsugo S, Noguchi N, Kaneko S, Takamura T.
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Journal Title
Nature Medicine
Volume: 23
Pages: 508-516.
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Oxidation and interaction of DJ-1 with 20S proteasome in the erythrocytes of early stage Parkinson's disease patients.2016
Author(s)
Saito Y, Akazawa-Ogawa Y, Matsumura A, Saigoh K, Itoh S, Sutou K, Kobayashi M, Mita Y, Shichiri M, Hisahara S, Hara Y, Fujimura H, Takamatsu H, Hagihara Y, Yoshida Y, Hamakubo T, Kusunoki S, Shimohama S, Noguchi N.
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Journal Title
Scientific Reports
Volume: 6
Pages: 30793
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Presentation] Selenoprotein Pの中和抗体による耐糖能異常及びインスリン分泌能の改善2016
Author(s)
三田雄一郎, 中山華穂, 稲荷尚吾, 西藤有希奈, 吉岡佑弥, 曽谷奏, 高部稚子, 御簾博文, 篁俊成, 高橋和彦, 野口範子, 斎藤芳郎
Organizer
第69回 日本酸化ストレス学会学術集会
Place of Presentation
仙台国際センター（宮城県・仙台市）
Year and Date
2016-08-30 – 2016-08-31
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[Presentation] セレノプロテインPの阻害抗体による糖尿病治療効果の解析-インスリン抵抗性及び分泌能を改善する抗体医薬の開発2016
Author(s)
三田雄一郎, 中山華穂, 稲荷尚吾, 西藤有希奈, 吉岡佑弥, 曽谷奏, 高部稚子, 御簾 博文, 篁 俊成, 高橋和彦, 野口範子, 斎藤芳郎
Organizer
第59回日本糖尿病学会年次学術集会
Place of Presentation
京都国際会館（京都府・京都市）
Year and Date
2016-05-19 – 2016-05-21
