2017 Fiscal Year Annual Research Report
Epstein-Barr virus infection-induced inflammasome activation in human leukocytes.
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16K19638
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
鳥居 ゆか 名古屋大学, 医学系研究科, 特別研究員(RPD) (00770281)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | EBV / インフラマソーム / 単球 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
（１）ヒト単球初代培養細胞におけるEBV感染とインフラマソーム応答
ヒト単球由来細胞株THP-1のEBV感染を確認後、より生体内に近い反応を示す単球の初代培養細胞を用いて、同様に感染するか検討した。Bリンパ球由来の細胞株(BJAB)を用いて設定した感染力価( Green BJAB Unit )を用いて6×10^5 及び6×10^6 GBUの力価のウイルス上清と単球の初代培養細胞とインキュベートし、48時間後、蛍光顕微鏡で観察したところ、6×10^6 GBUではGFP陽性の細胞が認められた。また、ウイルス上清とインキュベート後の培養上清からIL-1βの産生を認めた。細胞中のcaspase-1をイムノブロットで確認したところ、活性化caspase-1の発現上昇を認めた。インフラマソームを構成するパターン認識受容体 (PRR)であるNLRP3 (NOD-like receptor 3)、IFI16(Gamma-interferon-inducible protein 16)、AIM2 ( Absent in Melanoma 2)のmRNA発現を検討したところ、AIM2 ( Absent in Melanoma 2)のみ、発現が上昇していた。
（２）SiRNAを用いたAIM2ノックダウン細胞におけるインフラマソーム応答
これまでの検討から、単球のEBV感染に対するインフラマソーム応答にはAIM2が関与していると考え、エレクトロポレーション法を用いてTHP-1細胞にAIMおよびコントロールのsiRNAを導入し、AIM2ノックダウン細胞を作成し、同様にウイルス上清インキュベート後のインフラマソーム応答について検討した。ウイルス上清とインキュベート後のmRNAおよびイムノブロットの解析でcaspase-1は抑制された。しかし、培養上清中のIL-1βの産生には有意差が見られなかった。
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[Presentation] Risk Factors for Viral Infections in Pediatric Patients Undergoing Allogeneic Hematopoietic Stem Cell Transplantation.2017
Author(s)
Atsushi Narita, Yoshinori Ito, Yuka Torii, Juinichi Kawada,, Kyogo Suzuki, Eri Nishikawa, Nozomu Kawashima, Yusuke Okuno, Hideki Muramatsu, Nobuhiro Nishio, Asahito Hama, Seiji Kojima, Yoshiyuki Takahashi et al
Organizer
59th ASH Annual Meeting and Exposition
Int'l Joint Research
