2008 Fiscal Year Annual Research Report
エピジェネティクスの制御をめざした新しいレトロウイルスベクターの開発
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17016015
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
伊庭 英夫 The University of Tokyo, 医科学研究所, 教授 (60111449)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
箕口 滋 東京大学, 医科学研究所, 助教 (60322757)
山道 信毅 東京大学, 医学部付属病院, 非常勤医員 (30463897)
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| Keywords | miRNA / SWI / SNF複合体 / NFkB / AP-1 / Requiem / Decoy RNA / レトロウイルスベクター / レンチウイルスベクター |
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| Research Abstract |
本研究は、エピジェネティカルな遺伝子発現の制御の乱れやRNA干渉系の異常により生ずるヒト癌の征圧をめざして、この異常が生じる分子機構の解明を進めると共に、その成果に基づいた次世代型の遺伝子治療用のレトロウイルスベクターを開発することを目的としている。まず、ヒトの代表的なクロマチン構造変換因子であるSWI/SNF複合体にsubstoichiometricalに結合する因子としてhREQタンパク質をプロテオミクス解析により同定し、これがNFKBファミリー内のRelB/p52とSWI/SNF複合体の特異的なリンカーとして機能することを明らかにした。そしてhREQ遺伝子に対するshor thairpin RNAを高発現するレトロウイルスベクターを導入してhREQタンパク質の発現量を抑制すると、RelBの恒常的亢進が見られる細胞株での非足場依存性増殖を効率良く抑制することが示された。次に、ほとんどのヒト癌でその発現が亢進することが知られるmiR-21遺伝子のプロモーター領域の研究を行ない、このプロモーター内に、AP-1とNFIの結合部位があることを見い出した。これはmiR-21が癌細胞で高レベル発現するのは、一般に癌細胞中で内在性のAP-1活性が高いことを反映していることを示している。またmiR-21の標的の1つとして転写抑制因子NFIBを同定した。従ってmiR-21の発現はNFIBによりdouble negative feedbackの機構により制御されて、miR-21の発現はひとたび発現すると、その発現がいよいよ安定化することになることが示唆される。このことは、実際に開発したmiR-21発現レンチウイルスベクターの導入によって、内在性のmiR-21が上昇することからも証明された。さらに、特定のmiRNAの活性を長期間効率良く阻害するDecoy RNAを設計し、それをレンチウイルスベクターにより高発現させる方法も樹立した。その結果、いくつかの癌細胞株にこれを導入してmiR-21の活性を抑制することにより、極めて高い効率でアポトーシスを誘導してこれらの癌細胞株の増殖を抑制させることに成功した。
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Research Products
(11 results)
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[Journal Article] Mir-21 gene expression triggered by AP-1 is sustained through a double negative feedback mechanism2008
Author(s)
Fujita, S., Ito, T., Mizutani, T., Minoguchi, S., Yamarnichi, N., Sakurai, K., and Iba, H.
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Journal Title
J.Mol.Biol. 378
Pages: 492-504
Peer Reviewed
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[Journal Article] Class-specific regulation of pro-inflammatory genes by MYD88 pathways and IκBζ2008
Author(s)
Kayama, H., Ramirez-Carrozzi, V.R., Yamamoto, M., Mizutani, T., Kuwata, H., Iba, H., Matsumoto, M., Honda, K., Smale, S.T., and Takeda, K.
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Journal Title
J. Biol. Chem. 283
Pages: 12468-12477
Peer Reviewed
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[Journal Article] Brm transactivates the telomerase reverse transcriptase (TERT) gene and modulates the splicing patterns of its transcripts in concert with p54^<nrb>2008
Author(s)
Ito, T., Watanabe, H., Yamamichi, N., Kondo, S. , Tando, T. ,H araguchi, T., Mizutani, T., Sakurai, K., Fujita, S., Izumi, T., Isobe, T., and Iba, H.
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Journal Title
Biochemical J. 411
Pages: 201-209
Peer Reviewed
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[Journal Article] Role of glucocorticoid receptor in the regulation of cellular sensitivity to irinotecan hydrochloride
Author(s)
Akagi, T., Fukagawa, T., Kage, Y., To, H. , Matsunaga, N. , Koyanagi, S. , Uchida, A., Fujii, A., Iba, H., Ikemura, T., Aramaki, H., Higuchi, S., and Ohdo.S.
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Journal Title
J. Pharmacol. Sci. (in press)
Peer Reviewed
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[Journal Article] Ccbc2 and the Brm-type SWI/SNF complex cooperatively regulate villin expression in gastrointestinal cells
Author(s)
Yamamichi, N., Inada, K., Furukawa, C., Sakurai, K., Tando, T. , Ishizaka , A., Haraguchi, T., Mizutani, T., Fujishiro, M., Shimomura, R., Oka, M., Ichinose, M., Tsutsumi, Y., Ornata, M., and Iba, H.
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Journal Title
Exp. Cell Res. (in press)
Peer Reviewed
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[Presentation] Brm, a catalytic subunit of the SWI/SNF complex is required for Tat-independent stable expression of HIV-12008
Author(s)
Mizutani, T., Ishizaka, A., Tomizawa, M., Yamamichi, N., Tando, T., Iwamoto, A., and Iba, H.
Organizer
China-Japan ajoint Workshop on New-Generation Vaccines for Infectious Diseases
Place of Presentation
北京
Year and Date
2008-05-22
