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2005 Fiscal Year Annual Research Report

赤痢アメーバのプレニル転移酵素の生化学的・分子生物学的研究

Research Project

Project/Area Number 17590379
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

Research InstitutionJikei University School of Medicine

Principal Investigator

熊谷 正広  東京慈恵会医科大学, 医学部, 講師 (00271304)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 牧岡 朝夫  東京慈恵会医科大学, 医学部, 助教授 (90119850)
Keywords赤痢アメーバ / プレニル化酵素 / ゲラニルゲラニル化
Research Abstract

本年度は、赤痢アメーバ(Eh)のゲラニルゲラニル転移酵素II型(EhGGT-II)およびRab escort protein (REP)について、他種生物との相同解析、保存領域の検討、ならびに系統解析を行なうとともに、組換えタンパクを発現、精製し、その生化学的性状等について調べた。
EhのGGT-IIのαサブユニット(GGT-IIα)、βサブユニット(GGT-IIβ)およびREPは、それぞれ317、315、480アミノ酸からなり、それぞれのタンパク質に特有のドメイン配列が認められた。他種生物との相同性は、GGT-IIαでは14〜34%、GGT-IIβでは42〜49%、REPでは18〜23%だった。近隣結合法による系統樹では、哺乳類であるヒトとラットはクレードを作るが、Ehは酵母と同様に他種生物とクレードを作らず、独自に進化したものと考えられた。SDS-PAGEを行なったところ、大腸菌に発現させたEhGGT-IIの組換えタンパク質は、40kDのGGT-IIαと36kDのGGT-IIβとの複合体として精製されたことが確認された。REPは58kDであった。イムノブロットでは、抗EhGGT-IIα血清とEhREP血清は、それぞれ、EhGGT-IIα、EhREPとは反応せず、抗原性の違いが認められた。組換えEhGGT-IIは、哺乳類の酵素と同様に、REP依存性のゲラニルゲラニル化の活性を示した。基質特異性を調べたところ、ラットGGT-IIはEhGGT-IIより高率にEhRab11Cをゲラニルゲラニル化した。以上のことから、EhのGGT-IIは、系統的にも、抗原性に関しても、哺乳類のGGT-IIと著しく異なっていることが明らかとなった。また、EhGGT-IIと哺乳類のGGT-IIと基質特異性に違いがあることが示唆された。

  • Research Products

    (4 results)

All 2006 2005

All Journal Article (3 results) Book (1 results)

  • [Journal Article] Characterization of protein geranylgeranyltransferase I from the enteric protist Entamoeba histolytica2006

    • Author(s)
      Makioka A, Kumagai M, Takeuchi T, Nozaki T.
    • Journal Title

      Mol Biochem Parasitol 145・2

      Pages: 216-225

  • [Journal Article] Effect of artificial gastrointestinal fluids on the excystation and metacystic development of Entamoeba invadens2006

    • Author(s)
      Makioka A, Kumagai M, Kobayashi S, Takeuchi T.
    • Journal Title

      Parasitol Res (in press)

  • [Journal Article] Entamoeba invadens : cysteine protease inhibitors block excystation and metacystic development2005

    • Author(s)
      Makioka A, Kumagai M, Kobayashi S, Takeuchi T.
    • Journal Title

      Exp Parasitol 109・1

      Pages: 27-32

  • [Book] 蟯虫症.山口 徹ら編.今日の治療指針 2006年度版2006

    • Author(s)
      熊谷 正広
    • Total Pages
      1726
    • Publisher
      医学書院

URL: 

Published: 2007-04-02   Modified: 2016-04-21  

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