2019 Fiscal Year Annual Research Report
Molecular and structural basis for transcription and replication mechanism of influenza virus genome
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17H04082
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
野田 岳志 京都大学, ウイルス・再生医科学研究所, 教授 (00422410)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | インフルエンザウイルス / 転写 / 複製 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
インフルエンザウイルスは8分節のマイナス鎖一本鎖RNA（vRNA）をゲノムとして持つ。8種類のvRNAは各々、ウイルス核タンパク質NPおよびRNA依存性RNAポリメラーゼとともに二重らせん構造を有するribonucleoprotein複合体（RNP複合体）を形成する。RNP複合体は、vRNAの転写・複製を担う。しかし、RNP複合体からmRNAおよびcRNAが合成されるメカニズムについては、明らかにされていないことが多い。例えば、8種類のRNA分節（8種類のRNP複合体）でmRNA合成あるいはcRNA合成がどのように制御されているのか、また、cRNA合成時あるいはmRNA合成時のRNP複合体がそれぞれどのような構造変化を示すのかなど、全くわかっていない。そこで本研究では、RNP複合体の転写・複製機構（mRNAおよびcRNA合成機構）を構造学的観点から明らかにすることを目的とした。初めに、精製RNP複合体（A/PR8/34株）を用いたin vitroポリメラーゼ反応を実施し、転写産物としてmRNAおよびcRNAが合成されることをRT-PCR法にて確認した。また、高速原子間力顕微鏡（高速AFM）およびクライオ電子顕微鏡を用いてin vitroポリメラーゼ反応中のRNP複合体を経時的に観察し、RNP複合体の構造変化ならびにRNP複合体から合成された転写産物の構造を確認した。これら構造解析の結果から、二重らせん構造を保持したままRNA合成を行うRNP複合体だけでなく、二重らせん構造が変形したRNP複合体が合成RNAと結合している様子が観察された。今後は、これらのRNA合成の様式がcRNA合成あるいはmRNA合成のどちらを示すか、あるいは、二重らせん構造が変形したRNP複合体はabortiveなRNA合成を示しているか等に着目して研究を進める。
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| Research Progress Status |
令和元年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
令和元年度が最終年度であるため、記入しない。
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Research Products
(5 results)
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[Journal Article] N4BP1 restricts HIV-1 and its inactivation by MALT1 promotes viral reactivation.2019
Author(s)
Yamasoba D, Sato K, Ichinose T, Imamura T, Koepke L, Joas S, Reith E, Hotter D, Misawa N, Akaki K, Uehata T, Mino T, Miyamoto S, Noda T, Yamashita A, Standley DM, Kirchhoff F, Sauter D, Koyanagi Y, Takeuchi O.
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Journal Title
Nat Microbiol.
Volume: 4
Pages: 1532-1544
DOI
Peer Reviewed
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