2017 Fiscal Year Annual Research Report
免疫系の修飾による放射線増感機構：腫瘍細胞動態からの解明
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17H04375
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| Research Institution | Tokyo Medical and Dental University |
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Principal Investigator |
三浦 雅彦 東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, 教授 (10272600)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
戒田 篤志 東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, 助教 (40632097)
東 みゆき 東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, 教授 (90255654)
渡部 徹郎 東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, 教授 (00334235)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 放射線感受性 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
放射線と免疫チェックポイント阻害薬を併用する癌治療法が、近年大きな注目を集めているが、その機序に関しては不明な点が多い。本研究は、細胞周期を可視化するFucciと呼ばれる技術を駆使して申請者らがこれまで蓄積してきた知見を応用することにより、腫瘍細胞動態という従来とは全く異なる観点からその増感機構解明を目指す。本研究では、免疫系の修飾と放射線の併用により、腫瘍微小環境下で腫瘍細胞動態が大きく変動する結果、分割照射中の放射線感受性が影響を受けるとの仮説を立て、研究を進める。これまで我々は、ヒト口腔がん細胞株にFucciを導入した細胞株を樹立して、ヌードマウス皮下移植モデルを用いて、免疫応答を考慮しない研究を進めてきた。本研究では、免疫チェックポイントが関与する反応を見るため、T細胞の機能が正常な状況において検討する必要がある。そこで平成29年度は、C3Hマウスに自然発生し、口腔がんの免疫モデルとしても用いられるSCCVII細胞株にFucciシステムを導入した細胞株を樹立した。細胞周期の進行に伴い、周期的に赤色と緑色蛍光が変化するとともに、放射線の照射によってG2アレストが起こり、緑色細胞の蓄積が起こり、その後、リリースされていくことが確認でき、Fucciシステムが正常に機能していることが確認された。当初、昨年度初めに大学の共同研究施設導入される予定のX線照射装置の導入が、平成30年の２月にずれ込んだため、放射線を用いて行う実験が遅れている。照射時に増殖期と静止期にあった細胞のいずれが再発に関与するかを調べるためのCreERT2-loxPシステムを用いたモデルの作製は、順調に進んでいる。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
当初、昨年度初めに大学の共同研究施設導入される予定のX線照射装置の導入が平成30年の２月にずれ込んだため、放射線を用いて行う実験が遅れている。今年度は、Fucciを導入したSCCVII細胞株が樹立されたので、C3Hマウスに移植し、遅れた実験を取り戻す予定である。それ以外の研究については、順調に進んでいる。
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| Strategy for Future Research Activity |
平成30年度は、平成29年度の計画を継続して実施する予定である。1)SCCVII-Fucci細胞の樹立；2)免疫チェックポイント阻害と放射線併用による腫瘍増殖抑制効果の検証；3)免疫チェックポイント阻害と放射線併用による増殖分画と静止期分画の組織学的、機能的解析；4)増殖期細胞と静止期細胞のCre-loxPを利用したラベリング法の開発のうち、1)については既に細胞株の樹立が終わり、4)については、予定通り研究が進んでいる。2),3)については、当初、大学の共同研究施設として年度初めに導入される予定であったX線照射装置の導入が平成30年の2月と大幅に延期されたため、照射実験ができず、開始することができなかった。そこで平成30年度は、樹立したFucciを発現するSCCVII細胞をC3Hマウスに発現させ、2),3)について実験を進める。腫瘍増殖能が、本来のSCCVII細胞より大きく低下しているような場合は、Fucciを導入していないSCCVII細胞株を用いて実験することも検討する。4)については、増殖している細胞のみCreERT2-loxPがタモキシフェンによって核内に移行し、緑色から赤色に変化する仕組みを舌癌細胞に導入した細胞株を樹立したので、平成30年度は、マウス移植腫瘍で増殖細胞と静止細胞を別々にラベルすることを確認し、照射後、どちらの細胞が再発に寄与するのかについて検討を加える。
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Research Products
(15 results)
