2017 Fiscal Year Research-status Report
核様体凝集をトリガーとする複合ストレス環境への適応システムの解明
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17K07279
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| Research Institution | University of Tsukuba |
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Principal Investigator |
大庭 良介 筑波大学, 医学医療系, 准教授 (30447883)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
森川 一也 筑波大学, 医学医療系, 教授 (90361328)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 環境応答 / 核様体 / 遺伝子発現制御 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、黄色ブドウ球菌における、（i）本応答が複合ストレス環境への適応を実現していることの立証、（ii）核様体凝集を通じた遺伝子発現制御の実態（ゲノム位置依存性など）の解明、を目的とし、まず、複合的なストレス環境下で核様体凝集が生存に寄与するかを、黄色ブドウ球菌のmrgA遺伝子を対象とした分子遺伝学的方法により明らかにする。次に、核様体凝集による遺伝子発現制御の実態を、核様体凝集によるゲノム位置依存的な遺伝子発現制御の検討を通じて明らかにする。さらに、明らかとなった遺伝子発現制御の仕組みが、複合的なストレス環境下での適応に寄与するかを検討する計画である。核様体凝集のメリットを実証するためには、核様体凝集能力をもたないMrgA変異タンパク質を用いた検証が効果的であるため、本年度は、凝集能を欠いたmrgA遺伝子およびMrgAタンパク質の作成を行った。具体的には、MrgA結晶分子解析からDNA結合部位として期待されるアミノ酸13個のすべてに突然変異を導入した変異株、および、その変異遺伝子MrgAを強制発現する株を作成中である。現在、変異株作成のためのベクターに変異遺伝子を導入したpMAD-MrgA mutantは作成済であり、変異株のスクリーニングを進めている。
加えて、複合ストレスへの適応解明に向けて、黄色ブドウ球菌核様体の凝集前後での核様体タンパク質の変化をショットガンプロテオミクスによて明らかにし、これを「Identification of nucleoid associated proteins (NAPs) under oxidative stress in Staphylococcus aureus.（BMC Microbiol. 2017 Oct 2;17(1):207. ）」として発表した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
昨年度は、研究目的を達するための「道具」の作成に注力した。遺伝子上にまばらに散った13個箇所の突然変異を同時にいれる試みを行ったため、ターゲットのみに変異が入った変異遺伝子の取得に時間がかかってしまった。昨年度内にすでにこの部分についてはクリアしたため、今年度以降の当初目的に合わせた進展が期待される。
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| Strategy for Future Research Activity |
研究目的を達するための「道具」の作成に一段落がついたので、今後は当初研究計画通りに進めていく。
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