2019 Fiscal Year Annual Research Report
Functional analysis of Ror1-Rif signaling in malignant progression of non-small cell lung cancer cells
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17K08634
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| Research Institution | Fukushima Medical University |
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Principal Investigator |
西田 満 福島県立医科大学, 医学部, 教授 (30379359)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | がん浸潤 / Wnt / Rhoファミリー / 低分子量Gタンパク質 / フィロポディア |
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| Outline of Annual Research Achievements |
多くの非小細胞肺がん細胞株において、Ror1とRifが高発現していることに加え、Rif結合タンパク質として我々が見出したSmgGDSの全長（SmgGDS-607）とそのスプライシングバリアント（SmgGDS-558）の発現を確認した。また、Rifは細胞内においてSmgGDS-607と特異的に結合することを明らかにした。SmgGDS-607を特異的に発現阻害した結果、Rifを発現阻害した場合と同様にフィロポディア形成と浸潤が顕著に抑制された。次に、フィロポディア形成と浸潤との関係について検討するため、三次元マトリゲル中を浸潤している非小細胞肺がん細胞株PC-9の形態観察を行った。その結果、Ror1-Rif経路は極性を持ったフィロポディア形成を誘導することで、フィロポディア局所での基質分解と極性浸潤を誘導することが示された。最終年度においては、フィロポディア形成とWnt5a-Ror1シグナルとの関係について検討を行った。PC-9細胞においてWnt5aは高発現していたことから、その発現阻害を行った結果、Ror1の発現阻害と同様に、細胞内シグナル因子Dvlのリン酸化が顕著に減弱した。また、Wnt5aの発現阻害による影響は、リコンビナントWnt5aの添加によって回復したが、Ror1の発現阻害による影響は、同処理によって回復しなかった。これらの結果から、PC-9細胞ではWnt5a-Ror1-Dvl経路が恒常的に活性化していることが示された。さらに、RifまたはそのエフェクターであるmDia2の発現阻害によってもDvlのリン酸化が減弱することを見出した。これらの結果から、Rifを介したフィロポディア形成がWnt5a-Ror1-Dvlシグナルの活性調節に関与していることが示唆された。
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