2018 Fiscal Year Research-status Report

高感度甲状腺刺激抗体測定法を用いたバセドウ病の病態解析

Research Project

Project/Area Number	17K08982
Research Institution	Osaka University
Principal Investigator	日高洋大阪大学, 医学系研究科, 准教授 (30243231)
Project Period (FY)	2017-04-01 – 2020-03-31
Keywords	甲状腺刺激抗体
Outline of Annual Research Achievements	バセドウ病はＴＳＨレセプター（ＴＳＨ－Ｒ）に対する抗体が血中で陽性であることより診断される。測定法は、ＴＳＨ－Ｒへの結合能として検出する抗ＴＳＨ－Ｒ抗体（ＴＲＡｂ;ＴＳＨＲｅｃｅｐｔｏｒＡｎｔｉｂｏｄｙ）と、甲状腺への刺激活性（ｃＡＭＰ産生能）として検出する甲状腺刺激抗体（ＴＳＡｂ;ＴｈｙｒｏｉｄＳｔｉｍｕｌａｔｉｎｇＡｎｔｉｂｏｄｙ）の２つがある。未治療バセドウ病の診断における、感度・特異度ともＴＲＡｂがＴＳＡｂより優れていたが、２０１３年に高感度のＴＳＡｂ測定法（ヤマサ）が開発された。この高感度法で測定したＴＳＡｂは未治療バセドウ病の９８％で陽性で、ＴＲＡｂの９１％より優れた検査であると報告された。この高感度のＴＳＡｂ測定法はｉｎ　ｖｉｔｒｏでＴＳＨレセプター抗体を検出する実験系の確立にも有用であると考え、今回の研究を計画した。バセドウ病患者の末梢血単核球（ＰＢＭＣ）をＬｙｍｐｈｏｐｒｅｐＴｕｂｅで回収し、培養液（１０％ＦＢＳを加えたＲＰＭＩ１６４０液）中で６日間培養し、上清中のＴＳＡｂをヤマサの高感度ＴＳＡｂ測定法で測定した。結果はすべて測定感度以下であり、ＴＳＡｂを検出できなかった。つぎにＢ細胞を刺激する因子で抗体産生を促す必要があると判断し、バセドウ病患者のＰＢＭＣをＨｕｍａｎＢＣｅｌｌＥｘｐａｎｓｉｏｎＫｉｔと共に培養し、ＴＳＡｂを測定したが、やはり測定感度以下で検出できなかった。そこで他のＴＳＡｂ産生を促す刺激が必要と判断し、バセドウ病患者のＰＢＭＣをＴＳＨ－Ｒとともに培養したところ、ＴＳＨ－Ｒなしで培養した場合に比べ、ＴＳＡｂの指標となる上清中のｃＡＭＰ産生量が増加したことより、ＴＳＨ－Ｒによる刺激が有効であることが明らかになった。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 3: Progress in research has been slightly delayed. Reason ＴＳＨ－Ｒによる刺激が有効であることが明らかになったが、ＴＳＡｂの指標となるｃＡＭＰ産生量が十分ではないため。
Strategy for Future Research Activity	さらに高感度とされるＴＳＡｂ測定法であるイクオリンＴＳＡｂが近日中に発売された場合には直ちに検討する予定である。近日中に発売されない場合には、現在の測定系を用いて、抗体産生抑制作用のある薬物によるＴＳＡｂ産生抑制について検討する予定である。
Causes of Carryover	残額の18,702円ではTSAb測定試薬（170,100円）を購入できないため、次年度に繰り越して試薬購入費などに有効利用することにした。