2019 Fiscal Year Annual Research Report
Development of refined detection system for mature and active IL-1b family proteins
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17K08983
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| Research Institution | Shimane University |
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Principal Investigator |
浦野 健 島根大学, 学術研究院医学・看護学系, 教授 (70293701)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
杉浦 智子 島根大学, 医学部, 特別協力研究員 (60647402)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 炎症 / IL-1β / IL-18 / 測定キット / モノクローナル抗体 / バイオ医薬品 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
慢性炎症は、がんをはじめ、自己免疫疾患や生活習慣病、動脈硬化性疾患、神経変性疾患などさまざまな難治性疾患と密接に関連している。IL-1ファミリータンパク質は、炎症や感染防御に重要な役割を果たす実働分子である。これまでタンパク質を測定する方法は存在したが、その測定値と臨床症状との乖離が問題となっていた。臨床症状を反映した簡便・迅速・正確な測定法を確立し、モノクローナル抗体をシーズとしてバイオ医薬品を開発することを目的とした。
１）活性型IL-18の測定キットの開発：昨年度までに、大腸菌で発現させた活性型IL-18タンパク質をマウスに免疫しモノクローナル抗体を５種類した。また、炎症性サイトカインIL-1βファミリーのIL-18もIL-1βと同様にタンパク質分解酵素カスパーゼ１により切断され活性化されるため、切断部位のペプチドを用いてマウスを免疫し、活性型IL-18のみを認識するモノクローナル抗体を２種類作製した。これらの組合せから、活性型IL-18のみを認識するサンドイッチELISAキット化に向けて最適条件を検討し、最適な組合せを決定した。
２）活性型IL-1βのみを認識するマウスモノクローナル抗体の作製と精製：タンパク質分解酵素カスパーゼ１により切断させる活性化断端のペプチドを用いてマウスを免疫し、活性型IL-1βのみを認識するモノクローナル抗体を合計５種類作製した。
３）断端以外の活性型IL-1βを認識するマウスモノクローナル抗体の作製と精製：大腸菌で発現させた活性型IL-1βタンパク質をマウスに免疫し、断端以外の活性型IL-1βを特異的に認識するモノクローナル抗体を合計７種類作製した。２）３）で作製・精製したマウスモノクローナル抗体を用いて、その組合せから活性型IL-1βを認識するサンドイッチELISAキット化に向けて最適条件を検討し、最適な組合せを決定した。
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[Journal Article] Uric acid-mediated inflammasome activation in IL-6 primed innate immune cells is regulated by baricitinib.2020
Author(s)
Temmoku J, Fujita Y, Matsuoka N, Urano T, Furuya MY, Asano T, Sato S, Matsumoto H, Watanabe H, Kozuru H, Yatsuhashi H, Kawakami A, Migita K.
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Journal Title
Mod Rheumatol.
Volume: 9
Pages: 1-20
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Hydroxychloroquine inhibits IL-1β production from amyloid-stimulated human neutrophils.2019
Author(s)
Fujita Y, Matsuoka N, Temmoku J, Furuya MY, Asano T, Sato S, Kobayashi H, Watanabe H, Suzuki E, Urano T, Kozuru H, Yatsuhashi H, Koga T, Kawakami A, Migita K.
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Journal Title
Arthritis Res Ther.
Volume: 21
Pages: 250
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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