乳癌に対する新規治療薬の開発を目的としたマイクロRNA-569ノックダウン療法

2018 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 17K10558
• Research Institution: Nagoya City University
• Principal Investigator: 西本 真弓 名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 研究員 (00757883)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 遠山 竜也 名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 教授 (30315882) ; 近藤 直人 名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 講師 (90529166) ; 遠藤 友美 名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 講師 (20566228)
• Project Period (FY): 2017-04-01 – 2020-03-31
• Keywords: 乳癌 / miR-569 / TP53INP1

Outline of Annual Research Achievements

エストロゲン・レセプター（ER）陽性乳癌のなかには、予後不良なものが存在し、その治療成績の向上が喫緊の課題となっている。最近、乳癌の増殖に、miR-569が深く関与していることが報告された。私たちはこれまでに、miR-569の標的遺伝子であるTP53INP1の発現低下が、ER陽性乳癌の予後不良因子であることを初めて見出した。この研究により、TP53INP1 の発現を制御するmiR-569 が、ER 陽性乳癌の治療標的となり得るのではないかと考え、本研究を立案した。これらの研究成果を踏まえ、本研究では、ER陽性乳癌に対するホルモン療法の効果増強を目指したmiR-569ノックダウン療法の開発を目的とする。miR-569に関してこれまでに行った実験として、TaqMan RT-PCR システムを用いて、10 年以上の長期予後と臨床病理学的データが揃っている約500 例の乳癌症例を対象に、乳癌凍結標本からRNA を抽出し、miR-569の標的遺伝子であるTP53INP1遺伝子の mRNA発現と臨床病理学的因子および乳癌治療後の予後との検討を行った。その結果、全症例を対象とした検討だけでなく、術後ホルモン療法を行ったER陽性乳癌のみを対象とした解析においても、TP53INP1低発現は独立した予後不良因子であった。ER陽性乳癌においてTP53INP1発現の低下が組織学的悪性度と相関を認めたため、上皮間葉転換（EMT)に関連するマーカー（SNAI1、SNAI2、vimentin）とTP53INP1発現との関連を検討したが有意な相関は認めなかった。TP53INP1はmiR-569だけでなく、miR-155の制御を受けていることが報告されているため、miR-569およびmiR-155発現と予後との関連を検討したが有意な関連は認めなかった。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

乳癌細胞株におけるmiR-569 発現抑制（ノックダウン）に関する研究の進捗の遅れがある。miR-569に対するsiRNAを用いた検討に時間を要している。

Strategy for Future Research Activity

miR-569 高発現乳癌細胞株を対象に、miR-569 に対するsiRNA を用いて、miR-569 発現をノックダウンして、細胞増殖能をWST1 アッセイにて、アポトーシスの有無について検討する。さらに、各種ホルモン療法薬を同時投与した場合において、上記の解析を行い、miR-569 ノックダウン療法の既存のホルモン療法に対する増感効果について解析して、ヌードマウスへ移植した乳癌細胞に対するmiR-569 ノックダウンの増殖抑制効果に関する検討へと進める。