2018 Fiscal Year Research-status Report
重度末梢神経障害治療を可能とするHybrid Vein Wrapping法の開発
| Project/Area Number |
17K10944
|
|---|
| Research Institution | St. Marianna University School of Medicine |
|---|
Principal Investigator |
村上 賢一 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 講師 (40447298)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
内田 健太郎 北里大学, 医学部, 講師 (50547578)
國吉 一樹 千葉大学, 大学院医学研究院, 准教授 (40375788) [Withdrawn]
大鳥 精司 千葉大学, 大学院医学研究院, 教授 (40361430)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
|
| Keywords | コラーゲンシート / 塩基性線維芽細胞増殖因子 / Wrapping |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
昨年度までに再発性絞扼性神経障害などに対し行われる、Vein Wrapping術の痛覚過敏抑制機序の研究を行い、veinから放出される塩基性線維芽細胞増殖因子（bFGF)と神経内に発現するHeme Oxygenase-1(HO-1)が機序の一旦を担う可能性を示した。本年度はVeinの代替としてbFGF添加コラーゲンシート(bFGF/CS)を作成し、損傷神経に局所投与したときの疼痛過敏抑制効果を検討した。また、神経保護作用を有するHO-1の発現についても検討した。Wistar rat 8週齢雄を使用し、末梢神経障害モデルとして、Chronic Constriction Injury（CCI）モデルを用いた。bFGF/CSを損傷神経に巻いた（FGF群）、CSのみを損傷神経に巻いた(CS群)、CCIのみを行ったコントロール群（CON群）を作成した(各群n=25)。行動学的評価として、術後1,3, 5, 7, 14日目にvon Frey testを行った(各群n=5)。また術後1, 3, 5, 7, 14日目の坐骨神経からRNAを抽出し、RT-PCRを行い、損傷神経内でのHO-1の発現を検討した。また術後1日目の坐骨神経内でのHO-1蛋白の発現をELISA法で定量した。またHO-1の免疫染色を行い、陽性細胞をカウントした。術後1-5日目に、FGF群はCS群, CON群に比し、有意に疼痛過敏が抑制された。また、術後1-5日目に、FGF群はCS群, CON群に比し、損傷神経内でのHO-1 mRNAの発現が有意に高値を示した。FGF群ではCS群、CON群に比し、HO-1蛋白の上昇とHO-1陽性細胞数の増加が認められた。bFGF/CSによる疼痛過敏抑制が示され、また損傷した坐骨神経内でHO-1の発現が上昇した。bFGF/CSはHO-1の誘導を介して痛覚過敏を抑制している可能性が考えられた。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
当初から予定していたVein由来成長因子をコラーゲンシートに吸着したhybrid collagen wrapping法の開発に成功しており、おおむね順調に進展している。
|
| Strategy for Future Research Activity |
コラーゲン結合型成長因子を用いることで成長因子のコラーゲンへの結合力を向上させる。これにより、長期に渡り神経保護作用を維持できるhybrid collagen wrapping法の開発を行う。
|
| Causes of Carryover |
異動に伴い動物実験への着手に遅れが生じた。来年度に動物購入費として使用する予定である
|
